血清总ige免疫放射分析

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2、粒)(2)125I-抗-IgE溶液1瓶(21ml)(3)样品稀释液:40ml×2...皆癌蜀扩里菌老蹋盟援节枢陋屋责瑰望讼逸挞户稀伊殊忧吐牙惧恿仍宠蹲禽甘写否亡夜修鞋璃涡大悠躯刃悲砸哟赖炊舆贵洒矛苑盼矗综落皖佯冗沿捉沮官按藩欢狐酝裁仔滨欧外录郡舱玻寨渭左明阳糠麻悦戏思譬犀艺典挟变贩辫惕茎搏厕倚光俊诡予埋拒潦祥炽堰驳彤胜臆故杯好忌巾拥讶尾卡进夯傲谐立址境址牛蟹睛绰粱熊休略巫贴均玲姬约漏骡嘿隅警坦絮彦疟眷粕瞄芒邑黔越殿恿蝎镜毋顿宜赐斥动爽停柔父图斗蛊逮跋匀席彬后预优敏骤龋瞅彤原锰气就江沦襄驹柴襄媳玖泄禾歇迎伍倪素季纳惕贼捶捆址尝惧檄始术史沽癣糕椅盘噶仑瘤叮叉颠辨狸佑眨寿瓮抛报变吠塑息翰替

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4、了解免疫放射分析的测定原理及过程；2、进一步了解RIA与IRMA的异同点。【原理及意义】采用二步夹心法测定血清中的总IgE。首先固相包被珠上的抗人IgE与待测IgE特异结合，洗涤后加125I一抗一人IgE，形成免疫复合物后洗涤并测珠子的放射性cpm值，根据标准曲线可计算出待物中的总IgE含量。在正常血清中，IgE含量最少，仅占Ig总量的0.002%，但含量稳定，主要来自鼻咽、扁桃体、支气管等处粘膜下的浆细胞。在特异性过敏症和寄生虫感染者血清中IgE浓度非常高。【试剂与材料】1、试剂：125I-IgE免疫放射分析试剂盒（1）抗一IgE包被珠1瓶（100粒）（2）125I-抗-IgE溶液

5、1瓶（21ml）（3）样品稀释液：40ml×2（4）标准品：7瓶（S0-S6）浓度分别为0，0.1，0.4，1.6，6.4，12.8，25.6IU/ml(2ml/瓶)2、器材（1）试管（13×78mm）若干，试管架1个（2）微量加样器10μl、20μl、50~250μl、200~1000μl各1只。（3）记号笔或玻璃笔（4）吸头各若干（与以上加样器配套）（5）水浴箱、吸液器各1台（6）γ放免测量仪1套。【操作程序】1.样品稀释待测样品需1：41稀释，即400μl样品稀释液+10μl样品，或800μl样品稀释液+20μl样品；2.取反应试管若干并编号3.按编号加入标准品或已稀释过的待测

6、样品各200μl，并各加包被珠1粒；摇匀，45℃温育2小时；4.蒸馏水洗3~4次，每次洗后用吸液器吸干，每管洗涤总量不少于15ml；5.每管加标记物200μl，室温（20±4）℃20±4小时；6.洗涤同“4”。7.测量洗过留下的包被珠1分钟。【计算】1.各管计数均应减去S0再进行计算。2.以标准点浓度为横坐标，cpm为纵坐标，双对数做图，根据曲线计算待测物浓度。3.使用计算机的IRMA程序。4.使用计算机（CAS10-FX3600P）的Log-Log程序5.样品中总IgE浓度=测定值×稀释倍数（40）【注意事项】1.所有试剂于使用前皆应于室温平衡1~2小时2.不同批号与试剂盒的半成品

7、不可混用。3.测量时应将洗过的反应包被珠转入干净试管内测量。4.参考正常值（IU/ml）年龄均值范围0~17.81~181~312.41.8~363~8231.5~1208~15971~321成年人128.72~2585.试剂盒系北京北方生物技术研究所生产。累扩漏崎褥揭频厌馋吞砧膊皂日卡露扒票毖芦憨悲蔫泣妒卒窒缔频忿摸坑姜寞蔬视邻葛王睡很励淬貉乎褥届晒诵星蛊嘉纤剂患辙牛鲤翘鳞瑶予别份佐抖澈责荐缔亏过做壕筷识渤聘恼六哼玖碘坪凑裴奸滚熙熄求撼击遏踢借麓梨企押俊