胰腺tff2在大鼠实验性胃溃疡愈合过程中的表达及作用

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1、河北医科大学硕士学位论文胰腺TFF2在大鼠实验性胃溃疡愈合过程中的表达及作用姓名：王志勇申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：张雷；吴靖芳201203中文摘要胰腺TFF2在大鼠实验性胃溃疡愈合过程中的表达及作用摘要目的：消化性溃疡是目前发病率比较高的一种疾病。胃溃疡发生后胃黏膜的修复是一个复杂的过程。三叶因子家族是近年来发现的具有黏膜保护与修复、肿瘤抑制、信号传导等功能的一类小分子多肽，包括Ⅱ下1、TFF2和TFF3。TFF2在胃溃疡黏膜修复过程中具有促进细胞迁移，增强黏液粘性，减少一渗透的作用。TF

2、F2主要在胃肠道黏膜表达，但在人体其它器官也有表达。胰腺也是TFF2的重要表达部位。本论文通过对大鼠实验性胃溃疡形成和修复过程中胰腺TFF2基因和蛋白表达变化的研究，血清TFF2含量的检测，探讨在胃溃疡形成和愈合过程中TFF2的可能调节机制，为胰腺TFF2在胃溃疡自愈过程中的作用提供依据。方法：清洁级SD大鼠按随机数字表法分为溃疡组(n=42)、盐水对照组(n=42)和正常组(扁)。溃疡组在胃前壁近胃窦处黏膜下注射冰乙酸0．01ml，制备大鼠实验性胃溃疡模型。正常组不做处理。盐水组模拟溃疡组手术，注射等量生理盐水代替

3、冰乙酸。造模后第1、2、4、6、10、14、23d，对溃疡组和盐水组分批解剖，取胰腺组织，每次6只。正常组于造模后1天进行取材。分别测量各组溃疡部位的体积，用免疫组织化学法检测TFF2在胰腺的定位表达及溃疡组和盐水组TFF2表达的变化，于每张切片上随机选取5个高倍视野(×400)，使用Motic6．0软件并对图像进行半定量分析，分别获得各实验组大鼠胰腺组织TFF2阳性目标平均灰度。以SPSS18．0对各组数据进行ANOVA方差分析及q检验；RT-PCR检测各组胰腺TFF2mRNA的转录情况，PCR反应产物于1．5％琼

4、脂糖中电泳，用UVPGELDOC．IT凝胶成像系统观察并摄片，分别检测TFF2和GAPDH条带的吸光度，根据TFF2mRNA与GAPDH基因条带的光密度比值对TFF2mRNA表达水平进行半定量分析；用酶联免疫吸附实验检测血清中TFF2含量的变化。结果：，1成功获得大鼠胃溃疡模型，造模稳定，成功率高。术后1d，大鼠胃前壁形成一直径约4,-一6mm的圆形或椭圆形溃疡面，和外周界限清晰，外周中文摘要黏膜充血伴有水肿；溃疡术后第4d形成龛形溃疡，部分肝脏及周围大网膜粘连并包裹底部，很难分离；术后1"--'6天溃疡体积较大，之

5、后溃疡修复，溃疡体积减小，第23天溃疡局部接近愈合。2免疫组织化学染色及图像分析结果：胰腺TFF2阳性信号主要分布在胰岛，个别导管上皮也见TFF2表达。胃溃疡术后早期(1、2、4、6d)胰腺胰岛TFF2增多较为明显。溃疡术后6d，胰岛平均灰度值最低(87．98-4-3．93)(P<0．01)，TFF2阳性信号最强，随后表达下降，但仍高于相应盐水组及正常组(PO．05)。溃疡组2d'---23d胰

6、岛TFF2表达均强于相应盐水组(PO．05)。3溃疡组手术后1d开始，血清中TFF2的含量就开始显著增加，到第2天时含量达到最高值(338．62-q：58．72pmol／L)(PO．05)

7、。4RT-PCR法检测TFF2mRNA的转录情况TFF2mRNA在正常组呈低水平表达；溃疡组不同时间TFF2mRNA表达与正常组比较有明显差异，变化趋势与TFF2多肽的免疫组化结果类似。结论：1大鼠胰腺导管和胰岛中都有TFF2的表达，胰岛中的表达更为明显。2在胃溃疡自愈期间，胰腺TFF2表达明显增强，早期较多，后期随着胃溃疡的修复逐渐减少。血清TFF2含量升高。推测在胃溃疡愈合期间，胰岛合成的TFF2通过血液，作用于胃肠道黏膜，并对损伤进行修复。关键词：实验性胃溃疡；大鼠；胰腺；TFF2；免疫组织化学；酶联免疫吸附实

8、验；逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)英文摘要TheexpressionandfunctionofTFF2inratpancreasduringthehealingofexperimentalgastriculcerhealingoIexperimentalgastriCulcerABSTRACTObjectives：Pepticulceri