骨髓间充质干细胞移植对脑出血大鼠血肿周围mag、omgp表达的影响

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1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectofBoneMarrow—DerivedMesenchymaiStemCellsTranspIantationontheExpressionofMAG,OMgpinPerihematomaTissueinRatswithIntracerebralHemorrhageByYuYanSupervisor：Prof．YumingXuNeurologytheF

2、irstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2012学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：，矗焉J日期：夕护，z年r月衫日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。

3、根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅：本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：日期：纠L年厂月主1日摘要脑出血等中枢神经系统损伤往往遗留程度不等的神经功能障碍，这与成年中枢神经系统损伤后轴突再

4、生困难密切相关，常规治疗方法效果有限。干细胞以其特有的促进组织细胞再生的特性为中枢神经系统损伤的治疗带来希望，其中，骨髓问充质干细胞(Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells，BMSCs)以其来源于成体骨髓，没有伦理及免疫排斥障碍，易于体外标准化培养扩增、不易恶性转化，具有多向分化潜能及多种作用机制等优势更具临床应用的前景。MAG(myelin—associatedglycoprotein)、OMgp(oligodendrocytemyelinglycoprotein

5、)均为主要表达于中枢神经系统髓鞘的糖蛋白，具有抑制损伤轴突再生的作用，是目前已确立的髓鞘源轴突再生抑制因子，其研究为神经再生找到新的干预靶点，移植的BMSCs是否通过调节这些髓鞘源抑制因子的表达起到促进神经再生作用，有待于进一步研究。本研究采用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型，通过比较术后不同时间点假手术组、模型自然恢复组和BMSCs移植组神经功能评分及血肿周围MAG、OMgp表达的差异，来探讨BMSCs移植对大鼠脑出血模型神经功能恢复及血肿周围MAG、OMgp表达的影响，以进一步研究BMSCs移植治疗大

6、鼠脑出血的疗效机制，为BMSCs的临床应用提供更多理论依据和实验支持。目的：初步探讨骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑出血模型神经功能恢复及血肿周围MAG、OMgp表达的影响。方法：1．全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs，多次传代纯化，流式细胞术鉴定BMSCs表面标志和细胞纯度，取5～8代细胞移植用，移植前以BrdU标记BMSCs用以体内示踪：2．立体定向纹状体注入胶原酶法制作大鼠脑出血模型。体重250．3009的雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组及BMSCs干预组，假手术组只进行立体定位穿刺不注入胶

7、原酶，BMSCs干预组于造模术后24h经尾静脉注射摘要1×1071只的BMSCs悬液。3．各组于造模术后ld、3d、7d、14d采用mNSS和MLPT量表进行神经功能评分，并在各时间点分批处死大鼠取脑行免疫组织化学法检测血肿周围MAG、OMgp的表达情况，同时对Brdu行免疫荧光染色观察BMSCs脑内的分布。结果。1．假手术组术后1d、3d、7d、14d各个时间点均未见明显神经功能缺损，腩出血模型组神经功能缺损术后1d时即达高峰，可持续至3d时，7d时均可见较明显的恢复，14d时有进一步的恢复，BMSC

8、s干预组神经功能评分在3d、7d、14d各个时间点均较模型组明显降低，差异有统计学意义(P