米诺环素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

《米诺环素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、新乡医学院硕士学位论文米诺环素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用姓名：李长力申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：王玉梅201204新乡医学院硕士学位论文米诺环素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用摘要背景缺血性脑血管病具有高致残率、高死亡率和高发病率，严重危害着人类的健康。米诺环素具有神经保护作用，目前研究已经证实其是通过抑制基质金属蛋白酶表达、氧化氮类产物生成及自由基瀑布效应等机制来发挥作用；但米诺环素是否通过对胶质纤维酸性蛋白(glial曲rilla巧acidicprotcin，GFAP)和谷氨酸

2、(91utamate，Glu)阳性细胞表达的影响来发挥作用的，目前国内外尚缺乏报道。目的应用米诺环素作用于大鼠脑缺血．再灌注损伤模型，通过观察脑梗死体积及GFAP、Glu阳性细胞的表达情况，进一步探讨米诺环素对损伤后脑保护的作用机制。方法将120只雄性健康Sprague-Dawley大鼠，体重250～3009，随机分为正常组(N)、假手术组(F)、缺血．再灌注组(瓜)和米诺环素干预组(M)，每组再随机分为4组，分别为：缺血2小时后再灌注6、12、24、48h组，6、24、48h每组6只，12h组12只，6只用于石

3、蜡切片，6只用于TTC染色。米诺环素干预组在缺血2小时再灌注时即刻给予米诺环素45mg瓜g灌胃，以后每12小时追加22．5mg／l【g；缺血组(IR)和假手术组(F)给予同等量O．9％生理盐水灌胃。用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉闭塞(middlecerebral积e珂occlusion，McAO)模型，模型成功后，分别在缺血2小时再灌注6、12、24、48h进行神经功能评分，后断头取脑。各12h组随机取6只断头取新鲜脑组织进行TTC染色观察梗死灶体积。余各组大鼠灌注固定后断头取脑，分别取视交叉前后2mm组织，再固

4、定12小时，常规脱水、石蜡包埋及切片进行HE染色观察脑缺血．再灌注损伤的病理学改变，另行免疫组织化学染色观察各时间点GFAP、Glu阳性细胞的表达情况。新乡医学院硕士学位论文9士甲：口木1、神经缺损症状及功能评分：正常组(N)、假手术组(F)均未见明显神经功能缺损症状，米诺环素干预组(M)、缺血再灌注组(取)大鼠清醒后均出现不同程度的右侧偏瘫。米诺环素干预组(M)各时间点大鼠神经功能评分均较低于相应时间点缺血再灌注组(埘，两者差异有统计学意义(P

5、梗死灶，米诺环素干预组(M)、缺血再灌注组(ⅡU均可见明显不显色梗死灶，米诺环素干预组(M)各时间点梗死灶体积均较缺血再灌注组(IR)相应时间点小，两者差异有统计学意义妒<0．05)。3、苏木素-伊红(HE)染色光镜观察：正常组(N)、假手术组(F)脑组织细胞结构清晰，正常神经元数量多，无坏死细胞；缺血再灌注组(取)缺血半暗带区细胞数量明显减少，缺血区淡染，组织结构疏松，高倍镜下可见大量神经细胞变性坏死，大量空泡形成，正常神经细胞几乎消失；米诺环素干预组(M)缺血半暗带区正常神经细胞数量较缺血再灌注组(瓜)明显增

6、多。4、免疫组织化学染色：正常组和假手术组可见少量GFAP、G1u阳性细胞的表达；脑缺血再灌注组(m)、米诺环素治疗组(M)梗死区可见GFAP、Glu阳性细胞的大量表达，以梗死灶周边半暗带区为主；与脑缺血再灌注组(R)相比，米诺环素组(M)相应各时间点GFAP阳性细胞的表达量减少，而G1u阳性细胞的表达亦较缺血组相应各时间点明显减少，差异具有统计学意义(尸<0．05)。结论1、脑缺血再灌注早期给予米诺环素，可使脑缺血后神经功能评分下降，梗死体积减小，神经元坏死减少，提示米诺环素对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。2、

7、脑缺血再灌注后GFAP、Glu阳性细胞的大量表达；早期给予米诺环素可下调Glu的表达，进一步下调GFAP阳性细胞的过度增殖；我们推测米诺环素可能是通过抑制G1u的合成与释放，进一步抑制了GFAP阳性细胞的过度增殖，起到神经保护作用。关键词脑缺血再灌注；米诺环素；胶质纤维酸性蛋白；谷氨酸；2ProtectiveEf．fectsofMinocyclineonFocalCerebralIschemiaandReperfusionInjureinRatAbStraCtBackgroundIschemiccerebroVa

8、sculardiseasewauss嘶ouslyh锄“tohumallhealtllbecauseofitshi班morbidity，hi曲mortal时aIldhi曲incideIlce．Minocyclineplayedaneuroprotectiver01e．ThepresentstIldyhadconfimed也atitplayedtllerole缸u．ou北t1