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《骨髓间充质干细胞的分离与培养》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、第23卷第5期第三军医大学学报Vol.23,No.52001年5月ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEMay.2001553文章编号:10005404(2001)05055303论著骨髓间充质干细胞的分离与培养艾国平,粟永萍,闫国和,冉新泽,刘晓宏,罗成基,程天民(第三军医大学预防医学系防原医学教研室、全军复合伤研究所,重庆400038)提要:目的摸索体外分离培养骨髓间充质干细胞的最佳条件,并观察其部分生物学活性。方法采用常规的细
2、胞培养传代技术以及光、电镜技术和细胞增殖活性检测法,观察不同贴壁时间、不同浓度血清、不同种植密度对骨髓间充质干细胞生长、增殖、形态的影响,并观察培养细胞的部分生物学特性。结果以选用4~24h贴壁的有核细胞,加入5%~10%胎牛血清、种植密度4(4~8)10个/ml的培养条件为最适宜细胞生长;在此条件下,培养扩增的细胞仍具有干细胞多向分化性;其形态呈梭状,具有快速增殖的能力;培养细胞在3~4d进入对数生长期,随后进入平台期,分裂相细胞明显减少;光镜下细胞呈梭状或类成纤维状,2~10代的细胞呈均质状;超微结构显示为早期幼稚细胞
3、形态。结论建立了骨髓间充质干细胞体外分离、培养的条件,探讨了骨髓间充质干细胞部分生物学特性,为进一步深入研究骨髓间充质干细胞的诱导分化和应用打下基础。关键词:骨髓间充质干细胞;组织工程学中图法分类号:R329.2文献标识码:ACultivationandisolationofthebonemarrowmesenchymalstemcellsAIGuoping,SUYongping,YANGuohe,RANXingze,LIUXiaohong,LUOChengji,CHENGTianmin(Departm
4、entofRadiationMedicine,InstituteofCombinedInjuryofPLA,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:ObjectiveToobservesomebiologicalfeaturesofbonemarrowmesenchymalstemcellsandexplorethebestconditionsforisolatingandculturinginvitro.MethodsCommonce
5、llculturetechnique,lightandelectronmicroscopywereusedtostudytheeffectsofthegrowth,proliferation,morphologyofthebonemarrowmesenchymalstemcellsindifferentadherenttime,concentrationofserumandcelldensity.ResultsThe4bestcultureconditioninvitroforgrowthwas4-24hoursadher
6、enttime,5%-10%fetalbovineserum,(4-8)10/mlcelldensity.Thecellswerespindleinshapeandhadastrongabilityofproliferation.Thetimeforcellduplicationwas3to4days.Thecellsshowedthecharacteristicsofstemcellsinelectronmicroscope.ConclusionThebestconditionforisolationandculture
7、ofbonemarrowmesemchymalstemcellswassuccessfullyestablishedandsomebiologicalfeatureswereobserred.Itfoundabaseforfurtherinvestigationandusingofmesenchymalstemcells.Keywords:mesenchymalstemcell;tissueengineering干细胞是近年来研究的热点,骨髓中除造血干细mol/L的PBS(pH7.2)洗2~3次,1200r/min,各
8、离心10min;计9胞以外,还含有另一类干细胞间充质干细胞(Mes数,以210/ml种入10%FBSMEM培养基,青霉素100U/enchymalstemcell,MSC),在不同的诱导条件下,具有向ml、链霉素100g/ml,37,5%CO2孵箱中培养;不同时
