欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:32412547
大小:1.32 MB
页数:7页
时间:2019-02-04
《胰高血糖素样肽1对内皮祖细胞增殖分化能力的影响及其机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、中南大学学报(医学版)2010,35(12)http://xbyx.xysm.net1254JCentSouthUniv(MedSci)胰高血糖素样肽1对内皮祖细胞增殖分化能力的影响及其机制谢晓云,莫朝晖,陈科,何红晖,谢艳红(中南大学湘雅三医院内分泌科,长沙410013)[摘要]目的:探讨胰高血糖素样肽1(GLP1)对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖分化能力的影响及可能的作用机制。方法:采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,培养7d后,收集贴壁细胞。贴壁细胞用不含FBS的M199培养液培养24h后,分成4组:对照组和GLP1各浓度组(1,10,20nmol/
2、LGLP1共3组),分别用含0.2%BSA,1,10,20nmol/LGLP1的M199培养液培养72h。倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,MTT法检测EPCs的增殖能力;RTPCR技术检测EPCs中KDR,Flt1,VEcadherin,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达,ELISA法测定细胞上清液内皮细胞生长因子(VEGF)浓度,SP法检测细胞VEGF蛋白表达。同时用100ng/mLVEGFmAb对10nmol/LGLP1培养的EPCs进行干预。结果:与对照组比较,GLP1各浓度组EPCs增殖明显(P<0.05或P<0.01),EPCs中KDR,Flt
3、1,VEcadherin,eNOSmRNA表达增强,细胞上清液中VEGF浓度显著升高、细胞VEGF蛋白表达增强(P<0.05或P<0.01)。VEGFmAb(100ng/mL)下调GLP1培养的EPCs增殖能力,细胞KDR,Flt1,VEcadherin,eNOSmRNA表达下降。结论:GLP1对体外培养的人外周血EPCs的增殖和分化能力具有一定的促进作用,上调VEGF自分泌是其可能的作用机制之一。[关键词]胰高血糖素样肽1;内皮祖细胞;增殖;分化;血管内皮生长因子DOI:10.3969/j.issn.16727347.2010.12.009Effectofglucag
4、onlikepeptide1onproliferationanddifferentiationofendothelialprogenitorcellsanditsmechanismXIEXiaoyun,MOZhaohui,CHENKe,HEHonghui,XIEYanhong(DepartmentofEndocrinology,ThirdXiangyaHospital,CentralSouthUniversity,Changsha410013,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectandmechanismofglucagonli
5、kepeptide1(GLP1)ontheproliferationanddifferentiationofendothelialprogenitorcells(EPCs)derivedfromtheperipheralblood.MethodsMononuclearcellswereisolatedfromhumanperipheralbloodbydensitygradientcentrifugation.After7daysofculture,attachedcellswerestimulatedwithdifferentculturesof0.2%BSA,andGLP1(
6、1,10,and20nmol/L).LaserscanningconfocalmicroscopewasusedtodeterminetheEPCsfromhumanperipheralblood.TheactivityofEPCswasobservedunderreversemicroscope.MTTwasusedtodeterminetheproliferationofEPCs.TheexpressionofKDR,Flt1,VEcadherin,andeNOSmRNAwasdetectedbyRTPCR.Theconcentrationofserum收稿日期(Date
7、ofreception)2010-01-13作者简介(Biography)谢晓云,博士,医师,主要从事糖尿病血管病变研究。通信作者(Correspondingauthor)莫朝晖,Email:zhaohuimo_xy@126.com基金项目(Foundationitem)湖南省自然科学基金(06JJ5035)。ThisworkwassupportedbyNaturalScienceFoundationofHunanProvince,P.R.China(0
此文档下载收益归作者所有