成神经元样细胞的生物学性状

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1、第5卷第3期184中国科技论文在线SciencepaperOnline2010年3月β-巯基乙醇和bFGF分别诱导大鼠骨髓基质干细胞成神经元样细胞的生物学性状冯英，黄锦涛，谢富康（中山大学中山医学院组胚教研室，广州510080）摘要：比较β－巯基乙醇(BME)和bFGF分别诱导大鼠骨髓基质干细胞(MSC)所分化神经元样细胞的生物学性状。BME和bFGF分别作用于大鼠的MSC，分别于9h和5d后，进行神经元样细胞的细胞计数，然后用免疫荧光进行神经元特异性蛋白NF200的鉴定，RT-PCR的方法分析神经元特异性基因NF

2、的表达；westernblotting对检测神经元特异性蛋白NF200的表达。BME诱导的细胞在加入药物1h后形态发生改变，9h时有突起伸出，胞体变亮；bFGF诱导的细胞在诱导后第3天开始有突起伸出，呈神经元样，第5天突起之间相互连接，第7天胞体死亡；而2种药物所分化的神经元样细胞NF200的免疫荧光均成阳性，但bFGF诱导的神经元样细胞的阳性率要显著高于BME所诱导的神经元样细胞;在RT-PCR中，bFGF诱导的神经元样细胞神经元特异性基因NF200的表达要高于BME所诱导的细胞；westernblotting中

3、，bFGF诱导的神经元样细胞神经元特异性蛋白NF200的表达要高于BME所诱导的细胞。bFGF和BME均可诱导MSC分化为神经元样细胞。但bFGF所诱导的神经元样细胞在从形态上更接近于神经元，而神经元特异性基因NF200mRNA及神经元特异性蛋白NF200蛋白的表达，均高于BME所诱导的细胞。关键词：骨髓基质干细胞；神经元；诱导中图分类号：R363文献标志码：A文章编号：1673－7180(2010)03－0184－5Biologiccharacteristicstudyofβ-mercaptoethanoland

4、bFGFtoinduceratmesenchymalstemcellstoneuron-likecellsFengYing，HuangJintao，XieFukang(DepartmentofHistologyandEmbryology,SunYat-senUniversity,Guangzhou510080,China)Abstract:Tocomparethebiologicalcharacteristicsofneuron-likecellsfromratmesenchymalstemcells(MSC)in

5、ducedbyβ-mercaptoethanol(BME)andbFGFrespectively.BMEandbFGFwereaddedtoratMSCrespectivelyfor9hand5d.Theneuron-likecellsfromMSCwiththeneuronspecificproteinNF200wereidentifiedusingimmunofluorescence.ThegeneexpressionofNFwereanalyzedusingRT-PCRandtheproteinexpress

6、ionofNF200wereanalyzedusingWesternblotting.MSCinducedbyBMEappearedmorphologychangeinanhourandtheneuritecanbeseenatsixhour.Somecellbodiesbecamelighteranddied.MSCinducedbybFGFhadneuriteinthethirdday,andappearednetworkstructureinthefifthday,thencellsdiedintheseve

7、nthday.Atthesametime,TheresultofimmunofluorescenceshowedtheNF200expressionofneuon-likecellsinducedbytwowayswerebothpositive,butMSCinducedbybFGFwerestrongerthanthoseinducedbyBME.TheresultsofRT-PCRandwesternblottingweresameasthatofimmunofluorescence.BothbFGFandB

8、MEcan收稿日期：2010-01-09基金项目：国家自然科学基金资助项目(39970273)；高等学校博士学科点专项基金资助项目(20060558002)作者简介：冯英(1977－),女,博士研究生,讲师，主要研究方向：神经组织的发育和再生通信联系人：谢富康,教授,主要研究方向:神经组织的发育和再生,frankxie2000@yahoo.com第5卷第3期