人参总皂苷诱导pc12细胞神经元样细胞分化

人参总皂苷诱导pc12细胞神经元样细胞分化

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1、人参总皂苷对PC12细胞分化的影响李晗宇1,2王顺和1,2郑娟1,2姜蓉2(1.重庆医科大学病理学教研室;2.重庆医科大学干细胞与组织工程研究室;重庆400016)【摘要】目的研究人参总皂苷(TotalsaponinofPanaxginseng,TSPG)诱导PC12细胞神经元性分化的作用。方法:体外培养PC12细胞,观察PC12细胞在人参总皂苷的影响下细胞发生的形态学改变。诱导48h后透射电镜观察突触连接形成情况,72h后利用免疫细胞化学技术,观察人参总皂苷作用后PC12细胞向MAP-2阳性细胞分化的情况。结果

2、:与对照组比较,人参总皂苷诱导后的PC12细胞其突起和细胞直径明显增长和增大(P<0.01)。人参总皂苷能促进PC12细胞形成突触连接。人参总皂苷组MAP2阳性细胞数明显高于对照组(P<0.01)结论:人参总皂苷具有诱导PC12细胞神经元性分化的作用。【关键词】人参总皂苷;PC12细胞;分化【中图分类号】R736.6DifferentiationofPC12cellsinducedbyTotalsaponinofPanaxginsengLiHanyu1,2,WangShunhe1,2,ZhengJuan1,2,J

3、iangRong2(1.Departmentofpathology;2.Stellcellandorganizationprojectlaboratory,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,China)Abstract:ObjectivTostudythepotentialabilityofTSPG(TotalsaponinofPanaxginseng)toinducetheneuronaldiffenentiationofPC12cells.Methodsc

4、ulturedPC12cellinvitro,observedthemorphologicalchangesofPC12cellsundertheTSPG..ThesynapticlinkagewereobservedbytransmittingelectronicmicroscopeafterthePC12cellswereexposedtoTSPGfor48handtheexpressionofMAP-2wasdetectedbyimmunocytochemistryafter72h.Results:Thel

5、engthofneuriteandmaxdiameterofPC12cellsinTSPGgroupwereobviouslylongerandbiggerthanthoseincontrolgroup(P<0.01).TSPGcaninducePC12cellsformsthe7synapticlinkage.ThenumberofMAP-2positivecellswassignificantlyincreasedinTSPGgroupcompparedwithcontrolgroup(P<0.01).Con

6、clusionTSPGcouldinducetheneuronaldifferentiationofPC12cells.Keywords:TotalsaponinofPanaxginseng;PC12cells;differentiationCorrespondingauthor:WangShunhe,Tel:(023)68485789,E-mail:wangshunhe120@yahoo.com人参(Panaxginseng)是我国传统医食两用之珍品,而人参总皂苷(TotalsaponinofPanaxgins

7、eng,TSPG)是人参的主要药理活性成分【1】,有着广泛的药理作用,能稳定神经细胞膜、保护突触结构、增加突触数目,对神经递质的影响及抑制神经毒性作用等[2]。大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(pheochromocytomacells,PC12)起源于神经嵴,是目前广泛用来研究神经细胞功能、分化和凋亡的一种组织细胞培养模型。它可在神经生长因子(NGF)诱导下,通过激活酪氨酸激酶相关的受体TrkA完成信号转导【3,4】,抑制PC12细胞增殖,促进其分化成神经元样细胞。本实验用人参总皂苷诱导处理PC12细胞,观察其对PC

8、12细胞分化能力的影响,从而为进一步探讨其作用机制提供理论依据。1材料与方法1.1药物与试剂人参总皂苷(购自吉林宏久生物有限公司)由重庆医科大学干细胞研究室王亚平教授惠赠,纯度98%。实验前用DMEM培养液配置成2.5mg/ml浓度,正压过滤除菌,4℃备用。PC12细胞购自上海细胞生物学研究所细胞库;DMEM购自GIBCO公司,胎牛血清购自四季青,MAP-2单克隆抗体购自

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