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时间:2019-02-03
《mir164c和mir168a的表达与种子活力的关系研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..IAbstract.⋯⋯⋯.....⋯.⋯.⋯..⋯.⋯⋯.⋯⋯.⋯⋯.⋯....⋯.⋯⋯..⋯.⋯..⋯.⋯⋯⋯⋯...III1文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..11.1植物miRNA的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.1.1植物miRNA的发现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.1.2植物miRNA的形成与作用机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.11.1.3植物miRNA的生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.1.4植物miR
2、NA的研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..71.2种子活力及其调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141.2.1种子活力的形成及其生理机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..141.2.2贮藏过程中种子活力的变化及其生理机制⋯⋯⋯⋯一141.2.3种子活力的调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..151.3本研究的目的与意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172.1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯j⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯..172.1.1植物材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
3、⋯⋯⋯⋯172.1.2菌种及质粒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172.1.3引物序列⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172.1.4试剂和试剂盒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182.1.5仪器与设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202.2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.202.2.1种子的干燥与老化处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202.2.2种子萌发率的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯.212.2.3miRl64c和1NRl68a表达量的Real.timeqPCR检测⋯212
4、.2.4miRl64c、miRl68a沉默载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一242.2.5miRl64c、miRl68a过表达载体构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..312.2.6农杆菌介导的目的基因的kasalath遗传转化⋯⋯⋯⋯323结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯363.1miRl64c和miRl68a表达与拟南芥种子耐老化能力的关系363.1~拟南芥miRl64c与miRl68a突变体种子和野生型种子耐老化能力的差异⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.363.1.2拟南芥突变体种子和野生型种子的miRl64c
5、和miRl68a的表达量差异⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.373.2miRl64c和miRl68a的表达与水稻种子活力的关系⋯⋯⋯383.2.1水稻种子发育过程中种子活力形成与miRl64c和miRl68a表达量变化的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.383.2.2自然贮藏条件下水稻种子的活力变化与miRl64c和miRl68a表达量的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.413.3miRl64c和miRl68a过表达和沉默基因的水稻(kasalath)遗传转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423.3.1
6、miRl64c和miRl68a过表达和沉默基因的克隆与改造423.3.2miRl64c和miRl68a过表达载体和沉默载体的构建..433.3.3农杆菌介导的水稻kasalath的遗传转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯443.3.4转基因水稻的分子鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一453.4T0代转基因植株的表型初步观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯474讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.49参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一51附录一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
7、58附录二⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..64致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯65湖南师范大学学位论文原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..66miRl64c和miRl68a的表达与种子活力的关系研究1文献综述1.1植物miRNA的研究进展1.1.1植物miRNA的发现继1993年,Ambros研究小组的Lee[1】等人用遗传分析法在秀丽线虫(c.elegents)中首次发现了miRNA之后,2002年,Reinhart[2】首次从拟南芥中克隆到miRNA,由此开启了
8、研究植物miRNA的大门。到目前为止,已经在拟南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryzasative)、玉米(Zeamays)、苔藓(bryophyta)、烟草(Nicotianatabacum)、卷柏(Selaginellamoellendorffii)等【2‘6】植物中发现了大量的miRNA。迄今为止,m
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