vegf-a%2fvegf-c反义脱氧寡核苷酸对乳腺癌脉管生成及其生长转移影响

《vegf-a%2fvegf-c反义脱氧寡核苷酸对乳腺癌脉管生成及其生长转移影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、VEG事一AVEGF．CVEGFsASoDNMSODNODKLMVDMVD蛰NAcDNAmRNAhnRXART-PCRCDEeDFlRISpODMTTPCNA主要英文缩略语V矗∞ulafEnd躐heli舔Gf秭艟hFa髓orAVascularEndotheIialGrowthFa雌ofC盘管内皮细瑰生长黼子IA血管内皮细胞生长因子．C、憾c谴larE埘ot}撼lialGrow出F8ct∞fhm弼es血管内皮细胞生长飘子家族Ant{s髓seo瓤godeoxynucleoti踟反义脱氧寡核营酸MisscnseOligonu

2、cleotjde错义脱氧寡核苷酸0lig∞ueleotl如我氧寡竣萤酸轴嘲phaticMicrovesselDens埘微淋融管密度MicrovesseIDensity微血管密度Deoxyr淹鼹ueleieAcid聪鬣孩糖菝酸complimenta叫DeoxyribonucleicAcid互补脱氧核糖核酸Messengerl州A信使核糖核酸辩c耄e∞gene傩sNucle郭烈A孩内不均一列AReverseTr啪scfi科jonPolymeraseCh妇lReaction转录聚合酶链反应ColorDopplerEnergy

3、彩色多普勒能量瞪ColofD0pplef擎low酗鑫ging彩色多普勒盘流域像ResistiVeIndex阻力指数S蚍障lvi出n-Per0Xid罄e链霉藏抗生物素_道戴化物酶op

4、ic爵D∞s玲光密度3_囊5删m嘶№．．2．ylM，5埔ph朗业删ium嘶ni四甲慕偶氮唑盐微鼹酶反应艄}{fefati珏geellnucle嚣鞠tigc珏增戆缨缒核抗驻中文摘要VEGF矗／VEGF—C反义脱氧寡核昔酸对乳腺癌脉管生成及其生长转移的影响研究背景与目的瑟链膀癯瓣生会豹最大藏黪藏蹩冀其有远处转移的能力。秘髓已经证鞠{l孛瘸脉管生

5、成与肿瘸转移密切相关，而血管内皮生长因子A(VEGF—A)和赢管内皮生长因子C(VEGF-C)是血管内皮擞长匿予家竣(VEGFs)中最重要的两种隗子。其中VEGF-A主要在嚣孛瘸矗警生成过程中发挥重簧作强。焉VEGF-C麓键迸瓣癌湃巴管垒藏，挺进肿瘤细胞向区域淋巴结转移，且在肿瘸血管生成中与VEGF-A具有协同促进效应。我们以前的研究表明“3，VEGF—A及VEGF—C在人乳腺癌组织中均曼商表达(85。7％、90。8％)，VEGF-A爱VEGF-C表遮与游琵臻转移密韵相关。鏊予VEGF-A、VEGF-C在瓣瘤间质血管、

6、淋巴管生成中具有协同促进效应，怒最重要的促谶肿瘤间质脉篱生成因子，因此，同时阻断这两种因予的表达，可望爨蠢效地抑制肿瘤血管和游巴管的生裁，簸箍=l臻截翳瘤生长秘转移。反义脱氧寡核苷酸(ASOON)是人工合成的DNA片段，它与体内某信使梭糖核酸(mRNA)域脱氧核糖核黻(DNA)具露曩补序列，并熊通过碱基穰t对与互聿卜链杂交，簸磊避颧蘩颡表这。嚣ASODN吴有麓效、低毒、特辩洼强、定位准确等优点，已被逐渐开发成为一种新型的抗癌药物，ASODN作为一种药物真正走向临床己为期不远。目前，孱内夕}漪来见至b秘用反义脱氧寡核替酸

7、技术同时接抗孚L腺癌中VEGFs功能的报道。痤弱瓣谴移植(OrthotopicTransplantation)方法建立豹巍豫癌裸鬣鞭位移植瘤模型移植成功率荫，移植瘤生物学行为和药物动力学更接近予人体的源发瘤。因此，此模型成为研究肿瘤脉管生成、肿瘤生长转移及治疗的～个很好材料。结会驭主熬研究鹜袋，并校据VEGF家族戒爨菇宥部分结构阉源痒列的特点，我中文擒要们应用可阉时封闭VEGF-A、VEGF—C基因表达的ASODN片段，通过体外实验，观察该片段瓣乳艨瘗MCF-7缭魏VEGF-A鞠VEGF-C基因表达静季露割孛霉瑙：并在

8、攀L繇癌裸鬣原位移植瘸模型中观察藏对脉管生成及对肿瘤生长转移的影响：为开发同时封闭VEGF-A、VEGF—C基因袭达的反义药物奠定实验理论基础。方法一、瑙精质体(Lipofectamine“2000)介导ASODN转染MCF-7细胞，荧光倒置显微镜观察FITC荧光标记的ASODN转染率随时间变化的情况。二、lu糕的ASOI)N、错义脱氧寡援萤酸(撼sO默)积单缝l鹭璇体分别与MCF-7缨胞共培养48b，四甲基锅氮唑盐微量麟反应(辩T)法检测MCF-7细胞生长情况。三、luMASODN与MCF一7细胞共培养12、24、4

9、8、72h后，RT-PCR法检测VEGF—A轻VEGF—eml{NA的表达愤凝。西、建立久乳腺瘸裸鼠原位移穗癌模型，设立对照组、错义组和反义组。五、体内观察ASODN对裸鼠移植瘸VEGF—A和VEGF—CmRNA(RT—PCR)及赞白表达(免疫缀饯)的影响。六、彩色多普勒能凝图(cDE)稔测裸鼠移植瘸内血管丰鹰。七、5’单腺苷酸酶