骨髓间接coombs实验方法的应用与其对免疫相关性血细胞减少症患者的临床诊断意义

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1、天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：本研究旨在应用骨髓间接Coombs实验方法检测免疫相关性全血细胞减少症(Immuno—relatedPancytopenia，IRP)患者骨髓上清液中存在的自身抗体，并探讨其对患者的临床诊断意义。方法g1．研究对象为30例全血细胞减少患者(免疫相关性全血细胞减少症IRP22例，意义未明血细胞减少患者ICUS8例)及正常对照者15名。应用流式细胞术(FACS)检测骨髓造血细胞(CDl5+、GlyCoA+和CD34+细胞)膜表面抗体阳性率(IgM或IgG)。2实验组选取30例全血的骨髓上清液分别和15名正常对照者骨髓有核细胞(Bonemarrownu

2、cleatedcell，BMNC)、在37。C、5％C02孵育箱完全饱和湿度下孵育45分钟，对照组选取15名正常人骨髓有核细胞与自身骨髓上清液在相同条件下孵育。应用FACS检测孵育45min后骨髓造血细胞(CDl5+、GlyCoA+和CD34+细胞)膜表面抗体阳性率，并分析抗体阳性率与患者白细胞(WBC)、血红蛋白(HB)水平、网织红细胞百分率(RET％)、骨髓红系／粒系比例及树突细胞亚群比例(DCl／DC2)、CD5+B细胞比例和间接胆红素(IBIL)水平的相关性。3．上述30例全血细胞减少患者的骨髓上清液与自身BMNC、对照组选取正常人的骨髓上清液与上述30例患者的BMNC，对照

3、组选取正常对照者骨髓上清液与这30例患者的骨髓有核细胞，在上述条件下孵育45min，应用FACS检测BMNC(CDl5+、GlyCoA+和CD34+细胞)膜表面抗体阳性率，并分析抗体阳性率与上述各临床指标的相关性。结果：1．30例患者中，孵育前直接Coombs实验阳性者共16例，阴性者14例，15名正常人直接Coombs实验阴性；2．30例患者中，间接Coombs实验阳性者共16例，总阳性率53．33％(16／30)；直接Coombs实验阳性的16例中，12例间接Coombs实验阳性，阳性率为75％(12／16)；ICUS中有4例间接库姆实验阳性，阳性率50％(4／8)①实验组CDl

4、5+cells表面IgG阳性率为O．34％，显著高于对照组0．20％(P<0．05)：天津医科大学硕士学位论文②实验组CDl5+cells表面IgM阳性率为0．34％，显著高于对照组0．23％(P(0．05)；③实验组GlyCoA+cells表面IgG阳性率为(0．83士0．75)％，显著高于对照组(0．47+0．43)％(P

5、+cells表面IgM阳性率为0．21％，显著高于对照组0．00％(尸<0．05)：⑦CDl5+cells表面IgG阳性率与CD5+B细胞比例呈显著正相(严O．576，P=0．002)，与首次发病时白细胞数量、骨髓粒系比例、DC亚群水平等临床指标均没有相关性；⑧CDl5+cells表面IgM阳性率与CD5+B细胞比例呈显著正相关(r=0．412．P=0．037)，与首次发病时白细胞数量、骨髓粒系比例、DC亚群水平等临床指标均没有相关性；⑨GlyCoA+cells表面IgG阳性率与患者入院Hb水平(严-0．5497"=0．002)、RET％(严．0．475，P=0．009)、骨髓红系比

6、例(严。0．475，P=0．014)、DCl／DC2(严．0．421，P=0．03)呈明显负相关，与IBIL(严O．730，P=0．000)、CD5+B细胞比例呈显著正相关(严O．6847'=0．ooo)；⑩GlyCoA+cells表面IgM阳性率与患者入院Hb(产一0．488，P=0．010)、RET％(产．0．399，P=0．029)、骨髓红系比例(严．0．5045，P=0．012)及DCl／DC2(严．0．661．P--0．001)呈显著负相关，与间接胆红素水平(严0．430，P=0．018)、CD5+B细胞比例(FO．841，P=0．000)呈显著正相关。2．30例患者孵育后

7、骨髓膜抗体阳性者共18例，总阳性率60％(18／30)；在直接Coombs实验阴性的14例中，有12例患者自身骨髓上清液孵育后骨髓膜抗体阳性，阳性率为85．71％(12／14)，8例ICUS患者自身骨髓上清液孵育后，6例患者骨髓膜抗体出现阳性，阳性率75％(6／8)。①实验组CDl5+cells表面IgG阳性率为(2．72+3．24)％，显著高于对照组(1．03+1．15)％(P<0．05)：②实验组CDl5+cells表面IgM阳性率为(O．97士0．7