免疫相关性血细胞减少症患者igg亚型的研究

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1、分类号：R55学校代码：10062密级：学号：2012601122学位类别：科学学位专业学位学科门类：医学博士学位论文DOCTORALDISSERTATION论文题目：免疫相关性血细胞减少症患者IgG亚型的研究TITLEStudyofIgGsubclassofthepatientswithImmuno-relatedhemocytopenia一级学科：临床医学二级学科：内科学血液病学论文作者：邵媛媛指导教师：邵宗鸿教授导师组成员：付蓉教授王化泉教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月中文摘要目的检测免疫相关性血细胞减少(immuno-relatedImmuno-rel

2、atedhemtocytopenia,IRH)患者骨髓造血细胞膜上抗体免疫球蛋白G（immunoglobulinG,IgG）亚型，检测骨髓上清IgG各亚型含量，探索IRH患者IgG的优势亚型，为进一步揭示IRH患者的发病机制提供理论上的依据。方法1.研究对象为初治IRH患者（实验组），以意义未名的血细胞减少症患者(ICUS)及正常人分别为病例对照组及正常对照组，进行以下研究分析：(1)采用流式细胞术(FCM)检测IRH患者骨髓细胞(CDl5+、CD34+及GlycoA+细胞)膜抗体(IgM、IgG)；(2)FCM检测IgG(+)的IRH患者及正常人(CDl5+及Glyc

3、oA+细胞)膜抗体(IgG1、IgG3)；(3)采用免疫组化方法（IHC）对IgG(+)的IRH患者，ICUS组及正常对照组骨髓有核细胞进行IgG亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)染色。2.选取骨髓造血细胞膜抗体IgG阳性初治IRH患者为实验组，以IRH缓解病人、ICUS初治病人及正常人分别为病例及正常对照组，进行下述研究：(1)采用流式微球捕获技术（CBA）对骨髓上清IgG亚型（IgG1，IgG2，IgG3，IgG4）含量进行检测；(2)采用FCM对外周血CD5+CD19+/CD19+比例进行检测；（3）RT-PCR的方法检测外周血淋巴细胞IgG1的mRN

4、A表达。结果1.IRH患者骨髓造血细胞膜抗体IgG阳性率58.69%（27/46）明显高于病例对照组0%及正常对照组0%，骨髓造血细胞膜抗体IgM阳性率80.43%（37/46）。2.实验组CD15+细胞IgG1的阳性率明显高于正常人（（3.13±1.80）%vs（0.87±0.38）%），P〈0.05）；实验组CD15+细胞IgG3的阳性率明显高于正常人（（2.73±2.09）%vs（0.72±0.42）%，P〈0.05）；实验组GlyCoA+细胞IgG1的阳性率明显高于正常人（（3.97±2.21）%vs（0.87±0.41）%，P〈0.05）；实验组GlyCoA+

5、细胞IgG3的阳性率明显高于正常人（（2.24±1.82）%vs（0.71±0.50）%，P〈0.05）。3.应用免疫组化方法分别对实验组，ICUS患者及正常人骨髓有核细胞进行IgG亚型（IgG1，IgG2，IgG3，IgG4）免疫组化染色，11/15名IRH患者计数100个有核细胞IgG1阳性细胞≥3个，在ICUS患者及正常人骨髓有核细胞涂片染色中IgG1阳性细胞未见，对上述三组患者骨髓有核细胞涂片进行IgG2，IgG3，IgG4免疫组化染色，阳性细胞未见。4.应用CBA方法对实验组、IRH恢复病人、正常人及ICUS患者骨髓上清IgGI亚型（IgG1，IgG2，IgG

6、3，IgG4）进行检测。IRH组IgG1(6998.51±2498.38)mg/L明显高于IRH恢复组（（4702.27±1235.25）mg/L，P〈0.01)正常对照组（(5613.20±1640.93)mg/L,P〈0.05)和ICUS组（(5166.20±1761.64)mg/L,P〈0.01)。IRH组IgG3(637.63±252.93)mg/L明显高于IRH恢复组(（415.47±196.60）mg/L，P〈0.01)正常对照组((422.85±212.69)mg/L,P〈0.05)和ICUS组((485.70±197.29)mg/L,P〈0.05)。Ig

7、G2四组比较无统计学意义,IgG4四组比较无统计学意义。IRH组IgG（(10903.29±2576.10)mg/L)明显高于IRH恢复组（(8468.27±1957.58)mg/L,P〈0.05)。5.实验组CD5+CD19+/CD19+明显高于正常对照组及ICUS组((23.34±9.36)%)vs(13.67±5.10)%vs(12.40±3.63)%(P<0.01)，实验组CD5+CD19+/CD19+与骨髓上清IgG1水平呈明显正相关关系(r=0.392,P=0.043)。6.实验组，骨髓上清IgG1水平与中性粒细胞绝对值呈明显