丹参在大鼠离体肝脏保存时对h01的mrna和蛋白表达的作用

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1、摘要目的：建立大鼠离体肝脏保存模型，探讨丹参和Ho_1的mRNA及其蛋白在离体肝脏保存时的关系，进一步明确丹参对肝脏的保护作用的生物机制，为进一步提出丹参在缺血再灌注对肝脏保护作用提供理论依据。方法：一、通过逆转录一聚合酶反应(RT-PCR)测定各组时间段保存后HO-lmRNA表达情况；二、通过蛋白免疫组化监测各组时间段保存后Ho_1蛋白表达水平；三、用光镜观察各组不同时相肝细胞、肝窦皮细胞的形态变化；四、Ho_1的mRNA表达相对值及其蛋白的表达灰度值与肝脏损伤评分相关分析。结果：一、成功建立大鼠

2、离体肝脏保存模型；二、RT—PCR结果显示，丹参使HO-lmRNA的表达上调，经ZnPP预处理组微量表达；三、免疫组化结果显示丹参使Ho_1蛋白相对应于HO-lmRNA的表达上调而上调；四、病理切片可以证明经丹参处理后肝标本比对照组的干细胞、肝窦、损害明显较小，而经ZnPP预处理组较其他两组损害严重；五、在不同组相应的时间段HO-lmRNA的表达与肝组织损伤评分呈负相关，Ho_l的蛋白质表达灰度值与肝组织损伤呈正相关。结论：丹参可以诱导Ho_1的mRNA和蛋白的过表达，这种表达与肝组织损伤的关系，可

3、能是其对离体肝脏保护作用的机制之一。关键词：丹参血红素氧合酶缺血再灌注AbStractABSTRACTobjective：ToinvestigatetherelationsbetweensalviamiltiorrhizaandHO-1whenRatexvivoliverpreserved，furtherclearaboutthebiologicalmechanismofsalviamiRiorrhizaprotectivefunctiontotheliveroftherat，andproposet

4、heorybasisofthesalviamiltiorrhizaprotectivefunctiontotheliverinIschemia／reperfusioninjury．Method：1．HO-lmRNAexpressiondetectedbyReal—TimeReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction(RT-PCR)aftertheliverpreservedintimecompartmentsofeachgroup；2．HO-1protein

5、expressionleveldetectedbyImmunohistochemistryaftertheliverpreservedintimecompartmentsofeachgroup；3．Observedmorphousofhepatocyteandhepaticsinusoidendothelialcellbylightmicroscopeaftertheliverpreservedindifferenttimeofeachgroup；4．Evaluatedtherelationbetw

6、eenHO—ImRNAandproteinandliverinjurybycorrelationanalysis．Results：1．Ratexvivoliverpreservedmodehad。beensucceefullyestablished；2．ResultofRT-PCRdisplayedthatThesalviamiltiorrhizacausesHO—ImRNAexpressionup··regulationandmicroamountexpressioningroupafterZnP

7、Ppretreatrnent；3ResultofImmunohistochemistrydisplayedtllatThesalviamiltiorrhizacausesHO—Iproteinexpressionup-regulationandmicroamountexpressioningroupafterZnPPpretreatment；4．Pathologicalslicesmayprovelivercellandhepaticsinusoidendothelialcellthemostobv

8、iousinjuryCanbeseeningroupafterZnPPandsmallestinjuryinsalviamiltiorrhizagroup．5．ItofferinversecorrelationbetweenHO—ImRNAexpressionandliverinjury,positivecorrelationbetweengrayscaleofHO-Iproteinandliverinjuryinsametimeofdifferentgroup．Co