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《tnfa、nfκβ在肝脏缺血再灌注损伤中的作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、TNF-α、NF-κβ在肝脏缺血再灌注损伤中的作用摘要目的构建大鼠失血性休克复苏肝脏缺血再灌注损伤模型,用免疫组化方法探讨TNF-α、NF-κβ在肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法30只清洁级SD大鼠被随机分为假手术组(A组)、休克组(B组)、失血性休克/复苏(C组)亦称模型组。A组大鼠麻醉后,测平均动脉压(MAP)正常后直接处死采集大鼠肝组织。B组经股动脉穿刺置管放血,维持MAP为(35±5mmHg)持续90min后处死采集大鼠肝组织。C组大鼠麻醉后,经股动脉穿刺置管放血,维持MAP为(35±5mmHg)维持90min,回输自体血液进行复苏
2、,维持MAP80-100mmHg,制作失血性休克复苏模型,复苏6h后处死采集大鼠肝组织。通过HE染色了解肝组织病理形态学改变,SP免疫组化测定各组大鼠肝脏TNF-α、NF-κβ表达情况,并采用全自动图像分析系统(Image-proplus6.0)计算各组阳性区域积分吸光度。应用SPSS统计软件进行数据处理,计量资料用均数±标准差(x±S)表示,成组资料采用单因素方差分析,进行方差齐性检验,各组间相互比较采用t检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。结果A组HE染色肝组织结构及形态正常,B组见部分肝细胞空泡样变性,损伤较轻,C组肝组织损伤较
3、最重,肝小叶结构不清,肝细胞出现明显的空泡变性,肝窦淤血,并见大量中性粒细胞渗出及肝脏巨噬细胞聚集。免疫组化结果显示:C组表达TNF-α、NF-κβ最高,二者平均积分吸光度值分别为(0.197±0.026,0.131±0.035);B组的表达较C组低,二者平均积分吸光度值分别为(0.133±0.023,0.098±0.028);A组阳性表达最低,二者平均积分吸光度值分别为(0.075±0.030,0.045±0.021)。并经SPSS软件分析,各组间相互比较采用t检验,P值均<0.05,差别具有统计学意义。结论成功建立大鼠失血性休克复苏肝脏
4、缺血再灌注损伤模型;失血性休克复苏后可能通过TNF-α及NF-κβ高表达引起肝脏缺血再灌注损伤。关键词失血性休克肝脏缺血再灌注损伤TNF-αNF-κβ2TheroleofTNF-α、NF-κβintheliverischemia-reperfusioninjuryAbstract【Objective】ToinvestigatethefunctionofTNF-α,NF-κβintheroleofliverischemia-reperfusioninjury,usingimmunohistochemistrywiththemodelofhem
5、orrhagicshockandreperfusionliverinjury.【Methods】Thirtyratswererandomlydividedintoshamoperationgroup(GroupA),shockgroup(GroupB),hemorrhagicshock/resuscitation(GroupC).AnaesthetizetheratsinGroupA,whenmaintainingmeanarterialpressure(MAP)isnormal,directlycollectlivertissueafte
6、rtheexecutionofrats.PuncturethefemoralarteryofGroupBforbleeding,afterMAPas(35±5)mmHgfor90minitues,collectlivertissueofexecutedrats.Afterwards,anesthetizetheratsinGroupC,puncturethefemoralarteryforbleeding,thenMAPas(35±5)mmHgfor90minitues,recovertheratsbyreinfusionofautolog
7、ousblood,maintainingMAP80-100mmHgtoproducehemorrhagicshockandresuscitationmodel,moreover,collectlivertissueofexecutedratafter6hoursofrecovery.AccordingtoHEstaining,theunderstandingofpathologicalchangesofliver,thegroupconditionofSPimmunohistochemistryinliverTNF-α,NF-κβ,ther
8、egionalintegrationabsorbanceofeachgroupbyautomaticimageanalysissystem(Image-proplus6.0)ca