丹参注射液对新生鼠肾积水病肾损害的保护-研究

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1、结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．48参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯492、综述：丹参注射液对肾脏疾病保护作用的研究进展⋯⋯⋯⋯533、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯594、作者简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60型堡堂堕堡主堂篁笙茎丹参注射液对新生鼠肾积水病肾损害的保护研究中文摘要目的：探讨丹参注射液对新生鼠肾积水病肾的损害有否保护作用，以便为临床更好地治疗先天性肾积水患儿，提供可靠的实验与理论依据。方法：1、动物模型的建立选用生后48h内的wistar鼠120

2、只，随机分为5组，每组24只。随机选择1组行假手术，术后第3周开始以2．0m1．kgq"d一1生理盐水腹腔注射，建立对照组；余4组随机分为模型组、低剂量丹参组(干预1组)、中剂量丹参组(干预2组)和高剂量丹参组(干预3组)。实验组均采用腰大肌压迫左侧上段输尿管，制作左侧输尿管不全梗阻实验模型，模型组、干预1组、干预2组、干预3组术后第3周开始分别以2．0ml·k94．d。1的生理盐水、混合液1(丹参注射液与生理盐水之比为1：3)、混合液2(丹参注射液与生理盐水之比为1：1)、丹参注射液进行腹腔注射；各组动物再随机分为三个

3、亚组，分别在饲养5周、7周和10周时每组动物随机选取1个亚组处死，切取肾组织和收集尿液标本待检。2、各种指标的检测(1)、采集各组不同时期(不全梗阻模型建立干预5周、7周和10周)的病肾组织标本，进行HE染色光镜检查，以及应用透射电镜技术观察其超微结构的变化；(2)、采集不同时期的病I肾组织，通过免疫组织化学Pv法检测转化生长因子-p1(TGF—p1)的表达，应用Image．ProPlus图像分析软件测量平均光密度值；通过RT-PCR技术检测病1肾组织内TGF．p1mRNA水平的变化；(3)、收集各组不同时期的病肾肾盂尿

4、，应用ELISA法检测尿TGF．pI的水平。结果：1、动物模型建立期间，动物的存活情况：新生鼠共120只，建立1肾积水梗阻模型及喂养期间死亡7只(麻醉致死1只、术中死亡4只、喂养期间死亡2只)，存活113只(94．17％)。2、病肾组织形态学的变化：(1)、肉眼观及光镜下病肾组织结构的变化：对照组不同喂养时期，肉眼观双肾大小、形态一致，双肾肾小球、肾小管发育正常，肾小球饱满，肾小囊未见扩张；模型组随喂养时期的延长，病肾较健‘肾逐渐增大，肾孟扩张、积水，病’肾肾小球结构形态异常，肾小球鲍曼氏囊扩张，’肾小管扩张。同一干预组

5、随喂养时间的延长，肉眼观病肾仍大于健肾，镜下肾小球、肾小管的损害随时间延长呈加重趋势，但病理遵义医学院硕士学位论文丹参注射液对新生鼠肾积水病肾损害的保护研究分级明显低于模型组(火0．05)；但在同一喂养时间点，干预组随丹参剂量的增大，病肾组织结构的损害逐渐减轻。(2)、透射电镜下观察病肾组织的超微结构：对照组肾小球上皮细胞形态、结构正常，肾小管上皮细胞内线粒体嵴清晰可见；模型组见肾小球上皮细胞形态、结构异常，足突倒伏并呈节段性融合，近曲小管线粒体肿胀、空泡化，肾小管管腔内可见大量的细胞碎片；干预组病l肾超微结构均有不同程

6、度的改变，随喂养时间的延长损害逐渐加重，但均较模型组轻，同一喂养时间点随丹参剂量的增大肾小球上皮细胞形态结构损害减轻。3、各组病肾组织内TGF．B】的表达对照组肾组织内TGF—pl低表达，模型组病肾组织内TGF—B1在肾小管高表达，TGF-131mRNA表达也升高。干预各组病肾组织内TGF．B1均有不同程度的表达，且同一干预组随喂养时间的延长TGF—pl的表达量虽逐渐升高，但仍明显低于模型组；病肾组织内TGF．p1在同一干预组不同喂养时间点(喂养5周、7周、10周)间比较，低剂量丹参组内差异均有统计学意义(P<0．05)

7、，中剂量组和高剂量组在5周、7周间比较，差异无统计学意义(胗0．05)；同一喂养时间点随丹参剂量的增大，TGF—pl的表达量呈逐渐降低趋势，但高于对照组。对照组、模型组与各干预组问比较，差异均有统计学意义(氏0．05)。同一喂养时间点不同剂量丹参组(低、中、高剂量)间比较，在梗阻建立5周时，差异无统计学意义(胗O．05)，余各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0．05)。4、各组病肾肾盂尿内TGF．B】水平的变化对照组尿液中TGF．p1含量低，模型组病肾尿液中TGF．D】含量高，干预各组病肾肾盂内尿液(『肾盂尿)TGF

8、—p】含量位于对照组与模型组之间。对照组、模型组病肾尿液中TGF—pl水平与各干预组问比较，差异均有统计学意义(尸<0．05)。同一干预组尿TGF．p1不同喂养时间点(5周、7周、10周)间比较，低剂量、中剂量丹参组内差异均有统计学意义(P<0．05)，高剂量组在5周、7周问比较，差异无统计学意义(胗0．05)，余各