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《川续断皂苷vi和其活性代谢物在大鼠体内药代动力学探究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、川续断皂昔VI和其活性代谢物在大鼠体内药代动力学探究[摘要]研究川续断皂昔VI(asperosaponinVI,A-VI)及其活性代谢产物常春藤皂昔元(hederagenin,Ml)在大鼠体内的药代动力学、排泄特征和A-VI的大鼠血浆蛋白结合率。釆用已建立的LC-MS/MS法测定大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中A-VI和Ml浓度,计算药代动力学参数,并用平衡透析法测定大鼠血浆中A-VI的血浆蛋白结合率。大鼠以低、中、高(0.03,0.09,0.27g-kg-1)3个剂量分别单次灌胃给予A-VI后,A-VI的血药浓度-时
2、间曲线出现双峰现象,Cmaxl和Cmax2分别为(28.88±49.78)(4.480±1.872)35.19±23.53)(22.11±16.15)73.37±37.28)AUCO-t分别(43.21±37.32),Pg•h•L~1;tl/2(132.2±160.7)(133.9±102.5),(779.6±876.9)分别为(3.3±0・8),(3.2±2.3),(4.5±1.2)ho代谢产物Ml相应的Cmax分别为(16.03+9.336),(26.41土11.95),(28.71±5.874)ug•L-l;
3、AUCO-t分别为(105.6±73.60),(260.0±153.9),(323.l±107.9)ug•h•L-l;tl/2分别为(4.1±3.4),(4.4±2・3),(3.9±0.9)hoA-VI和Ml在大鼠体内药动学特征不存在性别差异,按0.09g・kg-1剂量多次灌胃A-VI后A-VI和Ml在体内均无蓄积。灌胃A-VI后,A-VI的胆汁和尿液排泄速率-时间曲线也出现双峰现象,灌胃A-VI6h以后可以在大鼠粪便中检测到Ml。A-VI在大鼠血浆中的平均血浆蛋白结合率为92.9%o[关键词]川续断皂昔VI;常春
4、藤皂昔元;药代动力学;蛋白结合率;胆汁排泄;尿液排泄;平衡透析法川续断皂昔VI(A-VI)是续断药材主要活性成分,具有抗氧化、镇痛、心肌保护和抗老年痴呆的药理作用[1-2]o常春藤皂昔元(Ml)为A-VI的主要活性代谢产物,具有抗抑郁、抗炎症等作用[3-4]o本课题组前期报道了大鼠粪便中A-VI的5个代谢产物[3],其中Ml为主要代谢产物;报道了LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中A-VI和Ml的方法及其在药动学预试验研究中的运用[5],LC-MS/MS测定比格犬血浆中A-VI的方法及其在药动学预试验研究中的运用[6
5、]。目前除了作者前期的初步研究,有关A-VI在体内的过程及血浆蛋白结合率未见报道。本实验对大鼠灌胃A-VI后原形及其活性代谢产物Ml的药代动力学及胆汁、尿液和粪便排泄进行研究,采用平衡透析法[7-8]考察了A-VI与大鼠血浆蛋白的结合情况,为A-VI的进一步研发和临床应用提供参考。1材料对照品川续断皂昔VI(批号200412009,纯度98.6%)和常春藤皂昔元(批号111733-200904,纯度98.0%).地西泮(批号171225-200903)和甘草次酸(批号110723-200612)购自中国食品药品检定
6、研究院;川续断皂昔VI原料药(批号20091101,纯度91.5%)为神华药业有限公司中试放大产品;甲醇和乙晴(色谱纯,MerkCompany);乙酸(色谱纯,江苏汉邦科技股份有限公司);其他试剂均为市售分析纯。Agilent1200液相色谱-Agilent6410B三重四极杆串联质谱联用仪,配有电喷雾离子源;pH计(型号PHS-25型,上海精密科学仪器有限公司);高速离心机(型号1612-1型,上海医疗器械集团有限公司);数显恒温水浴锅(型号HH-2型,国化电器有限公司);Sartorius电子天平(型号BP21
7、1D);透析袋(MWC0:8000-1万Da,2.7cm,上海蓝季科技发展有限公司)。SPF级SpragueDawley(SD)系大鼠,体重180〜210g,雌雄各半,由浙江省实验动物中心提供,合格证号SCXK(浙)2008-0033o2方法2.1生物样品检测方法见参考文献[4]。2.2大鼠单、多次灌胃A-VI的药动学研究取大鼠48只,体重180〜210g,随机分成4组,每组12只,雄雌各半。单次灌胃A-VI组:实验前禁食12h(不禁水),按低、中、高(0.03,0.09,0.27g-kg-1)剂量分别灌胃给予A-
8、VI的0.5%CMC-Na混悬液,于灌胃A-VI前及灌胃A-VI10,20,30min,1,2,3,5,7,9,11,14,18,24,30h后,眼眶静脉丛取血100uL于肝素化离心管中,4000r•min-1离心10min,分取血浆30uL置于-80°C冰箱中保存,待测;给药后2h给予食物。多次灌胃A-VI组:按每次0.09g•kg-1剂量灌胃给予A-VI