ssr分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度

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1、SSR分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度  摘要:以青花菜新品种‘津青一号’及其亲本为试验材料,用SSR分子标记技术鉴定杂交种种子纯度,从50对SSR引物中,筛选出了1对在杂交种和父、母本之间存在显著差异的引物(L21),该引物扩增片段电泳条带清晰可辨,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对108株‘津青一号’杂交种进行纯度鉴定,结果为96.30%,与大田形态鉴定结果98.15%相比,SSR标记与大田种植鉴定结果基本一致。这表明,引物L21可用于‘津青一号’的纯度鉴定。  关键词:

2、青花菜;SSR;种子纯度鉴定  中图分类号:S635.3文献标识码:ADOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2016.  HybridPurityIdentificationofBroccoliVariety‘JinqingNo.1’UsingSSRMethod  JIANGHanmin,WENZhenghua,LIULili,SHANXiaozheng,SUNDeling  (KeyLaboratoryofVegetableGermplasmResourcesInnovat

3、ion,TianjinKernelVegetableResearchInstitute,Tianjin300384,China)  Abstract:Inthispaper,broccolihybrids,'JinqingNo.1'anditsparentswereusedasplantmaterials,SSRmolecularmarker8wasusedtoanalysisthepolymorphismofthesematerials.Amongthe50pairsofSSRprimersscr

4、eened,onepairofprimers(L21)hadsignificantandlegibledifferencesbetweenhybridseedsandtheirparents.108individualseedsweretestedwiththeprimer,andtheseedpuritywas96.30%,whichwasclosedtotheresultidentifiedinthefieldof98.15%.TheresultsindicatedSSRprimerL21cou

5、ldbeusedtodetectthepurityof'JinqingNo.1'.  Keywords:Broccoli;SSR;seedpurityidentification  青花菜(BrassicaoleraceaL.var.italica),又名西兰花、青花椰菜等,属于十字花科芸薹属1、2年生草本植物。青花菜以主茎及侧枝顶端形成的绿色花球为食用部位,营养物质丰富,无论色泽、口感都备受青睐,深受广大群众所喜爱。8  在青花菜的种植生产中,青花菜杂交种子的纯度在很大程度上影响了品质和产量。在种

6、子生产中,由于一些不可避免的因素混入自交产生的F1代种子或劣质种子及一些其他品种的杂交后代,从而导致生产出的种子纯度不高。在种子市场上,不法商贩销售的假冒种子在很大程度上也降低了种子的质量。保证杂交种子的纯度及优良品质,成为确保青花菜市场供应优质青花菜的一个重要前提。鉴定种子纯度的传统方法是大田形态学鉴定,该方法在鉴定周期和鉴定费用上有其局限性,且形态观察的准确度难以保证。分子标记技术的出现使种子在分子水平上的鉴定成为可能。分子标记技术在种子鉴定方面的应用,节省了鉴定的时间和成本。SSR是DNA分子

7、标记中的一种,是以PCR为基础的技术,多态性高,成本较低,标记呈显性和共显性,操作较易实现,重复性较好[1]。有研究报道,利用SSR分子标记技术能准确鉴定青花菜种子的纯合度[2]。此外,SSR分子标记也已经应用到其他经济作物种子纯度的鉴定,包括水稻、油菜、大豆、玉米等[3-10]。  本研究以津青一号及其父、母本为研究材料,利用SSR分子标记进行筛选,以期得到能产生特殊标记的引物,在检验该引物可靠后将其运用到杂交种子的鉴定中,供杂交种子在分子水平鉴定借鉴。  1材料和方法  1.1材料  试验材料为

8、11DR-100(父本)、10FS-2(母本)、津青一号(F1代)。  1.2SSR鉴定种子纯度的评价  1.2.1全基因组DNA提取以改良CTAB法提取全基因组DNA,获得的全基因组DNA用1%琼脂糖凝胶电泳检测纯度并保存备用。  1.2.2SSR引物根据GenBank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez)网站上公布的青花菜EST序列设计合成SSR引物,选取长度大于100bp的EST序列,共合成SSR引物50对。  1.

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