白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖及其与pten的关系研究

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1、DOI:10.16016/j.1000-5404.201410125白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖及其与PTEN的关系研究胡培,伍秋香,袁霜雪,王东旭,刘映孜,何百成,孙文娟(400016重庆,重庆医科大学药学院药理教研室,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室)[摘要]目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法采用结晶紫染色、流式细胞术和Westernblot分析Res对HCT116细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞术和免疫荧光分析Res对HCT116细胞凋亡的促进作用;采用Westernblot和PCR分析Res对HCT11

2、6细胞内Akt1/2及PTEN表达水平的影响;通过重组腺病毒介导的PTEN过表达或沉黙表达,分析Res抑制HCT116细胞增殖及其与PTEN的关系。结果与对照组相比,Res处理组HCT116细胞增殖受到抑制(P<0.05,P<0.01),G1期细胞比例也随Res浓度增加而升高,同时PCNA蛋白表达水平下降;流式细胞术分析结果显示,Res能明显促进HCT116细胞凋亡;Westernblot和PCR分析结果显示,Res对Akt1/2mRNA表达无明显影响,但能降低Akt1/2的磷酸化水平,同时促进PTEN表达。外源性过表达PTEN能增强Res对HCT116细胞的增殖抑制作用(P

3、<0.01),而沉黙PTEN表达能部分逆转Res对HCT116细胞增殖的抑制作用(P<0.01)。结论Res对HCT116细胞增殖具有抑制作用,并能促进其凋亡;Res的这种作用可能与其促进PTEN表达,抑制PI3K/Akt活化有关。[关键词]白藜芦醇;结肠癌;增殖抑制;凋亡;PTEN;PI3K/Akt[中图法分类号][文献标志码]ARelationshipbetweenproliferationinhibitioneffectofresveratrolandPTENincoloncancercellsHuPei,WuQiuxiang,YuanShuangxue,WangDon

4、gxu,LiuYingzi,HeBaicheng,SunWenjuan(ChongqingKeyLaboratoryofBiochemistryandMolecularPharmacology,DepartmentofPharmacology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofresveratrol(Res)oninhibitingproliferationofcoloncancercellsandexploretheposs

5、iblemechanism.MethodsTheproliferationinhibitioneffectofResinHCT116coloncancercellswasmeasuredbycrystalvioletstaining,flowcytometryandWesternblot.Then,theapoptosiswasdetectedbyimmunofluorescenceassayandflowcytometry.TheexpressionsofAkt1/2andPTENandthephosphorylationofAkt1/2inHCT116cellswerea

6、nalyzedbyRT-PCRandWesternblot.Finally,theeffectofPTENontheproliferationinhibitioneffectofReswasevaluatedbyrecombinantadenovirusforPTENover-expressionorknockdowninHCT116cells.ResultsResinhibitedtheproliferationofHCT116cellsinaconcentration-dependentmanner(P<0.05andP<0.01),arrestedthecellcycl

7、eatG1phase,down-regulatedtheproteinlevelofPCNA,andpromotedtheapoptosisofHCT116cells.PCRandWesternblotresultsindicatedthatReshadnosignificanteffectonthemRNAexpressionofAkt1/2,butcoulddecreasethephosphorylationofAkt1/2.RescouldincreasetheexpressionofPTENin

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