细胞凋亡与角膜移植免疫反应关系的初步研究_1

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果细胞凋亡与角膜移植免疫反应关系的初步研究作者：杨朝忠，张军，华山，吴艳蕊，祝东升，马路生【摘要】目的研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子FasL在新鲜及深低温保存后角膜的表达情况、角膜细胞凋亡情况及其与角膜移植免疫排斥反应的关系。方法对35例角膜移植手术剩余组织应用免疫组织化学SABC法分别进行Fas和FasL蛋白染色。应用Tunel法对上述标本进行细胞凋亡的研究。观察35例部分穿透性角膜移植免疫排斥反应发生发展情况。结

2、果角膜细胞Fas蛋白及FasL蛋白均为细胞质和细胞膜着色。角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白均呈阳性表达。角膜上皮细胞及内皮细胞FasL蛋白均呈阳性表达，而角膜基质细胞则无FasL蛋白表达。新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas、FasL蛋白阳性表达量经统计学分析差异无显著性。凋亡的角膜细胞均为细胞核着色。25例新鲜角膜平均每高倍视野可见凋亡细胞个，经冷冻保存后的角膜每高倍视野可见凋亡细胞平均为个，经统计学处理P课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济

3、具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果＜，差异有显著性。角膜移植免疫排斥反应发生与角膜的新鲜程度有关，新鲜角膜部分穿透性角膜移植术后6～12个月的免疫排斥反应发生率为12%，深低温保存角膜移植后6～12个月的免疫排斥反应发生率为10%，二者差异无显著性。结论新鲜和深低温保存后的角膜均可见Fas、FasL蛋白的表达。其中Fas在角膜上皮、基质和内皮细胞均表达，FasL在角膜上皮、内皮细胞表达，而基质细胞不表达。新鲜角膜可见极少量凋亡细胞，角膜经深低温冷冻保存后，凋亡细胞数量显著增加。降温-复温损

4、伤可能与细胞凋亡有关。角膜移植免疫排斥反应发生与角膜的新鲜程度有一定关系，深低温保存后角膜的抗原性可能降低，不易引起免疫排斥反应的发生。【关键词】Fas蛋白；FasL蛋白；凋亡；角膜移植免疫排斥【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenexpressionofFas/FasLandapoptoticcellsinnormalcorneaanddeepcryopreservativewithcorneagraftrejectioninhuman.MethodsSABCimmunohistoch

5、emistrymethodwasappliedtostudytheexpressionofFas/FasLinparaffin-embededsectionsofcornea.Thetunel(TdTmediatedbiotindUTPnick-endlabeling，TUNEL)techniquewasusedto课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成

6、果studywhetherapoptosiswouldhappyinbothnormalcorneaanddeepcryopreservativeinhuman.ResultsInallpositivecells，Fas/FasLwerekytoplasmandcellmembranewaspositiveexpressionofFasprotEinwasdetectedin5/5cornea，sowasFaslproteinisexpressedincornealepithelial，keratocyteandendothelialligandprote

7、inwasdetectedincornealepithelialandendothelial，neitherwaskeratocytenumberofapoptoticcellswassignificantlyhigheraftercryopreservation(±)thannoncryopreservation(±)(P＜).Therateofcorneagraftrejectionwas12%(nomalcornea)and10%(cryopreservativecornea).ConclusionFasproteinandFasLligandpro

8、teinexpressedinallcorneawerenotre