血清胆固醇的测定实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划血清胆固醇的测定实验报告生物化学与分子生物学设计实验小组成员：班级：麻醉11-2班日期：XX年12月19胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇及二乙酰一肟法测定血清尿素实验目的1、掌握酶法测定总胆固醇的原理和方法。2、学习用比色法测定血清尿素。3、巩固有关胆固醇和尿素的知识。4、进一步熟练UV2100型分光光度计的重点、难点：重点：1、氧化酶法测定总胆固醇的原理2、二乙酰一肟法测定血清尿素的注意事项难点：氧化酶法测定总胆固醇的原理一、实

2、验原理氧化酶法测定血清总胆固醇血清总胆固醇(TC)包括：游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)两部分。本实验是胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和过氧化物酶相偶联发生的偶联反应。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划血清胆固醇的测定实验报告生物化学与分子生物学设计实验小组成员：班级：麻醉11-2班日期：XX年12月19胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇及二乙

3、酰一肟法测定血清尿素实验目的1、掌握酶法测定总胆固醇的原理和方法。2、学习用比色法测定血清尿素。3、巩固有关胆固醇和尿素的知识。4、进一步熟练UV2100型分光光度计的重点、难点：重点：1、氧化酶法测定总胆固醇的原理2、二乙酰一肟法测定血清尿素的注意事项难点：氧化酶法测定总胆固醇的原理一、实验原理氧化酶法测定血清总胆固醇血清总胆固醇(TC)包括：游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)两部分。本实验是胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和过氧化物酶相偶联发生的偶联反应。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其

4、的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划第一步：血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA)。第二步：胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC含量成正比。二乙酰一肟法测定血清尿素二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4，5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含

5、量成正比。因二乙酰不稳定，故由试剂中二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。二、操作步骤氧化酶法测定血清总胆固醇终点法检测TC，取试管3支按下表依次加样。酶法测定TC操作步骤加入物(μl)血清标准液或定值血清蒸馏水酶试剂空白管－－XX00标准管－20－1000测定管20－－1000目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划混匀后，37℃保温10min，每

6、管加3ml水混匀，用分光光度计比色，于500nm波长处以空白管调零，读出各管吸光度。二乙酰一肟法测定血清尿素取试管3支，按下表依次加样。二乙酰一肟法操作步骤加入物(ml)血清尿素标准应用液蒸馏水二乙酰一肟溶液酸性试剂空白管－－标准管－－测定管－－混匀，置沸水浴加热12min，取出置冷水中冷却5min，以空白管调零，在540nm处读取各管吸光度。三、注意事项氧化酶法测定血清总胆固醇1、最后加酶试剂，各管反应时间应一致；2、比色应在30min内完成；3、试管在操作前尽量保持干燥；4、试剂中酶的质量影响测定结果；5、若需检测游离胆固醇浓度，将酶

7、试剂成分中去掉胆固醇酯酶即可。二乙酰一肟法测定血清尿素1、试剂中加入氨基硫脲和镉离子，可增进显色强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现象，(每小时小于5%)。煮沸显色经冷却后，应及时比色。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划2、尿液中尿素也可用此法测定，但因浓度高，需先用去离子水作50倍以上稀释。3、注意洁净干燥，加量务必准确。4、水浴时注意打

8、开水浴箱盖，以免水汽入管。5、酸性试剂中酸的含量较浓，要小心使用。四、思考题1.血清胆固醇浓度升高或降低有何临床意义？2.血清尿素浓度升高或降低有何临床意义？3.血清非蛋白氮(NPN)与尿素的