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时间：2019-08-03
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1、血清总胆固醇的测定（酶法）一、目的了解胆固醇的测定方法掌握胆固醇测定临床意义二、原理胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的作用下生成游离胆固醇和脂肪酸。游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶的作用下生成胆脘-4-烯-3-酮和过氧化氢，过氧化氢再加4-氨基氨替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成红色的苯醌亚胺。其反应如下：三、试剂宁波慈城生化试剂厂生产的胆固醇测定试剂盒中包括：缓冲液二瓶：90ml×2酶溶液一瓶：10ml×2工作液：临用时按需要量将试剂1和2按9：1的比例混匀即成，其他工作液置4℃冰箱一周内稳定。标准胆固醇液一支：1ml，浓度为4.09mmol/L(100mg/dl)。四、器材试
2、管、微量加样器、恒温水浴箱、分光光度计等。五、操作取试管3支，编号，按下表依次操作：六、计算胆固醇浓度（mmol/L）=A测/A标×C标C标为4.09mmol/L参考范围：正常人静脉空腹血清胆固醇浓度为2.6—6.5mmol/L七、注意事项1．测定标本要求空腹抽血。2.酶法测定胆固醇的前二步反应特异性高，而指示反应（第三步反应）特异性则较差，干扰反应往往发生在指示反应。溶血标本、黄疸标本及高血脂标本均不影响测定结果，但血液中一些还原性物质，如维生素C、谷胱甘肽及左旋多巴可与色原性氧受体竞争H2O2，使结果出现偏差。3．胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，造成结果偏低。八
3、、思考题本次测定的血清样本Ch值是否正常？血清胆固醇浓度异常见于哪些临床疾病？
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