血清总胆固醇浓度测定.ppt

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1、第3次实验-1胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇实验原理血清总胆固醇(TC)游离胆固醇(FC)胆固醇酯(CE)1.胆固醇酯胆固醇酯酶游离胆固醇＋游离脂肪酸2.胆固醇胆固醇氧化酶Δ4-胆甾烯酮＋H2O23.2H2O2＋4-氨基安替比林＋酚过氧化物酶苯醌亚胺非那腙＋4H2O(红色，500nm波长)37℃水浴37℃水浴计算：测定管浓度标准管浓度=测定管吸光度标准管吸光度×测定管浓度＝（血清TC）测定管吸光度标准管吸光度标准液浓度1按下表加样(试管应做好标记)加入物(μl)空白管标准管测定管血清——20胆固醇标准液—10—蒸馏水2010酶试剂10001000

2、1000操作步骤血清TC(mmol/L)=A测定A标准混匀，37oC保温5分钟在试管中加入1ml蒸馏水500nm波长比色，空白管调零，读出吸光度计算：兔血清TC参考值：0.77～2.00mmol/L5.17mmol/L2×注意事项1.最后加酶试剂，各管反应时间应一致；2.试管在操作前尽量保持干燥；3.比色应及时，30min内完成;4.若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成分中去掉胆固醇酯酶即可。第3次实验-2二乙酰一肟法测定血清尿素二乙酰一肟+H2OH+二乙酰＋羟胺实验原理4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物二乙酰+尿素H+△(红色，520nm波长)操作

3、步骤1按下表加样（试管先做好标记）加入物(μl)空白管标准管测定管血清——20尿素标准液—20—蒸馏水20——试剂1100010001000试剂21000100010002混匀，沸水浴15分钟3常温冷却5分钟4520nm波长比色，空白管调零，读出吸光度5计算：血清尿素(mmol/L)=×10mmol/L参考范围：兔血清尿素2.86～8.20mmol/LA测定A标准注意事项1.煮沸显色经冷却后，应及时比色。2.注意试管洁净干燥，加量务必准确。3.水浴时注意打开水浴箱盖，以免水汽进入试管。4.酸性试剂中酸的含量较浓，要小心使用。5.尿液中尿素也可用此

4、法测定，但因浓度高，需先用去离子水作50倍以上稀释。预习下次实验课内容