微生物的染色实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划微生物的染色实验报告　　一、实验题目：微生物的革兰氏染色　　二、实验目的：　　1、学习并初步掌握革兰氏染色法；　　2、了解革兰氏染色的原理；　　3、巩固显微镜的使用。　　三、实验原理：　　革兰氏染色是1884年丹麦病理学家ChristainGram氏创立的，是细菌学中最重要的鉴别染色法。染色步骤分为四个部分：　　1、初染：加入碱性染料结晶紫固定细菌图片；　　2、媒染：加入碘液，碘与结晶紫形成一种不溶于水的复合物；　　3、脱色：利用有机溶剂乙醇或丙酮进行脱色；　　G-和G+细胞壁的比较

2、：　　1、阳性菌细胞壁特点：细胞壁厚，只有一层，主要由肽聚糖构成，肽聚糖含量高，结构紧密，脂类含量低。当乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层孔径变小，通透性降低，结晶紫和碘的复合物被保留在细胞壁内，复染后仍显紫色。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　2、阴性菌细胞壁特点：细胞壁薄，由两层构成，内壁层和外壁层，细胞壁中脂类中脂类物质含量较高，肽聚糖含量较低，网状结构交联程度低，乙醇脱色时溶解了脂类物质，

3、通透性增强，结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来，因此，革兰氏阴性菌细胞被脱色，当复染时，脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色。　　四、实验器材：　　1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。　　2、溶液和试剂：革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95%乙醇、番红复染液、水。　　3、仪器及其他用品：酒精灯、载玻片、显微镜、接种环、试管架、滤纸、滴管。　　五、实验步骤：　　1、取一个载玻片，将其洗净并沿一个方向擦拭干净，直至液体不再其上收缩为止；将接种环整平，用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌，按常规方法图片，应涂大，不宜过厚。　　2、打开酒精灯，用火焰固定，不宜烤得太狠，否则菌种呈假阳性。　

4、　3、轻旋结晶紫染液滴管，将其旋出，滴加1滴草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部位，染色40s。　　4、染色完成后倾去染液，水洗至流出水为无色。　　5、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。　　6、在涂菌部位滴加碘液，覆盖1min。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　7、媒染完成后，倾去碘液，水洗至流出水无色。　　8、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。　　9、将载玻片放在白色笔记本上，用滴管滴加95%

5、乙醇脱色，脱色30~40s，不宜脱色太狠，否则菌种呈假阴性。　　10、脱色完成后立即用水洗去乙醇。　　11、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。　　12、滴加番红复染液，染色4min。　　13、染色完成后，水洗至流出水无色。　　14、吸去残留水并晾干。　　15、用显微镜观察并绘图。　　用以上步骤完成：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的混合图片染色、大肠杆菌单独菌种染色、金黄色葡萄球菌单独菌种染色。　　六、注意事项：　　1、选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。　　2、图片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。　　3、脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过

6、度造成假阴性。　　七、实验结果与讨论：　　1、结果：　　绘出高倍镜下观察的菌体图像。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　2、思考题：　　写出常见的革兰氏阳性菌与阴性菌，包括致病菌。　　革兰氏染色的原理是什么？印象因素有哪些？　　如何验证你的染色结果是否正确？　　实验二细菌的普通染色和革兰氏染色　　一、实验目的　　1．掌握细菌涂片标本的制备方法和普通染色的步骤；2．掌握革兰氏染色法的步骤和关键

7、点；3．识别细菌的革兰氏染色结果；4．学习无菌操作技术。　　二、实验原理　　一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径大，不能阻止溶剂透入，因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。　　虽然如此，革兰染色的差异并不能完全认为