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1、丹参素对高脂血症大鼠脂代谢调节机制研究黑龙江省哈尔滨市香坊区成高子镇中心卫生院150039摘要:目的:探讨丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法:选用清洁级雄性SD大鼠60只,随机选取12只为基础对照组,饲以普通饲料,其余大鼠饲以高脂饲料,造模成功后随机分为高脂对照组和注射低、中、高(10,20,40mg·kg-l·d-l)剂量丹参素溶液(溶解于生理盐水)的试验组,2个对照组腹腔注射等体积生理盐水,每天腹腔注射1次,连续30d。检测血清TG,TC,HDL-C及LDL-C含量及肝脏ACC1,FAS,HMGR,CPT-I的mRNA表达水平。结果:注射丹参
2、素后,大鼠血清中TG,TC,LDL-C含量降低,肝脏FAS和HMGR的mRNA表达水平显著降低。结论:丹参素通过降低TC含量,抑制LDL-C水平,及时清扫多余的胆固醇,有效调节高脂血症大鼠血脂水平;通过降低FASmRNA表达减少脂肪酸的合成,抑制HMGRmRNA表达来减少内源性胆固醇的合成。关键词:丹参素;高脂血症大鼠;血脂水平;mRNA表达水平根据《中国营养与健康现状(2012年)》报道,我国成人高血脂症的患病率为20%,估计患病人数为1.6亿人,同时高血脂症也是高血压、糖尿病、冠心病、脑卒中的重要危险因素,长期的高血脂可导致动脉粥样硬化,增加心脑血管的发病率和死亡率[1-2
3、]。高脂血症是由于全身脂肪代谢或运行异常,使得血浆中的脂质高于正常范围的一种全身性疾病,脂代谢紊乱是诱发高脂血症的关键原因,因此维持血脂代谢平衡对预防高脂血症的发生只有重要意义。目前调节血脂所用的药物如羟甲基戊二单酰辅酶A还原酶抑制剂、烟酸类等均存在一定的副作用,如肝脏功能损害、胃肠功能紊乱等,而中医药以其深厚的理论和灵活多变的组方在高脂血症的治疗中起到了重要的作用。中医药治疗高脂血症有其独特的优势:药源丰富,毒副作用小等。近年来,许多学者对丹参及其制剂的复杂组分进行体内外定性或定量分析,尤其是对脂溶性成分进行了大量的研宄,发现丹参酮IIA具有增加冠脉血流量、改善缺氧心肌的代谢
4、紊乱、提高心肌耐缺氧能力、抑制血小板集聚及抗血栓形成等作用。然而中医传统用药方法是用其水煎剂,即丹参的水溶性部位,所以研究丹参的水溶性成分更有意义。丹参水溶性成分的药理作用广泛,以往主要集中在循环系统上,近年来的研究表明丹参素具有降脂的功效。丹参素是1980年从丹参中分离出的一种酚性芳香酸类化合物,常作为丹参原药材和丹参制剂质量控制的指标成分,具冇很强的抗脂质氧化、抗肝纤维化、改善尿毒症、改善肾功能等作用。孙锡铭等发现丹参素具有抑制细胞内源性胆固醇合成和抗脂蛋白氧化作用,从而防止氧化脂蛋白对细胞的损伤。丹参素在降脂方面发挥着重要的作用,但0前国内外冇关丹参素如何调节血脂代谢的研
5、宄甚少,在高脂血症动物模型上的实验没有任何报道。为研究丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响,本试验以高脂血症大鼠为模型,通过给予不同剂量的丹参素,阐述丹参素对高脂血症人鼠血脂代谢的影响及其作用机制,为丹参素作为一种降脂有效成分在中药的开发与应用中提供理论基础和新的研宄思路。1材料1.1动物清洁级雄性SD大鼠60只,由浙江中医大学动物实验研究中心提供,初始体重差异均不显著。试验用基础饲料由实验中心提供,高脂饲料购自江苏省协同医药生物工程有限责任公司,配方为基础饲料68%,猪油10%,蛋黄粉10%,蔗糖10%,胆固醇2%。丹参素钠(CAS:67920-52-9)购自上海源叶生物科技有限
6、公司,纯度≥98%。1.2仪器及试剂日立7020全自动生化分析仪;ABI(ABI7500)实时荧光定量PCR仪。RIzolReagent(Invitrogen,15596026),PlatinumSYBRGreenqPCRSuperMix-UDG(Invitrogen,11733-038),dNTP(Takara,D4030RA),RNaselnhibitor(Takara,D2313A),M-MLV(Takara,D2639A),甘汕三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固(LDL-C)试剂盒均购自上海申能-德赛技术诊断有限公司
7、。2方法2.1试验处理选用清洁级雄性SD大鼠60只,适应性饲养观察1周,根据人鼠的初始体重随机选取12只为基础对照组,饲以普通饲料,其余人鼠饲以高脂饲料,每天12h光照维持,昼夜循环,自由饮水进食。于第6周末夜间禁食12h后眼眶采血检测血脂水平,血脂含量升高并与基础对照组差异显著的大鼠作为成功高脂模型纳入试验。选取造模成功的人鼠按血脂水平随机分为高脂对照组和腹腔注射低、中、高(10,20,40mg·kg-l·d-l)3个剂量丹参素的实验组。各实验组大鼠腹腔注射丹参