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《黄秋葵多糖的体外抗氧化活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、黄秋葵多糖的体外抗氧化活性研究摘要：以遵义黄秋葵为对象，制备了黄秋葵多糖，研究了英多糖成分的体外抗氧化活性。结果表明：黄秋葵多糖对DPPII、轻基自由基(？()11)和超氧负离子(0-2?)均具有良好的清除作用，与Fe2+有较强的螯合能力,并但黄秋葵多糖的抗氧化作用呈现一定的浓度依赖性。关键词：黄秋葵；多糖；抗氧化活性中图分类号：R285文献标识码：A文章编号：1674-9944(2017)6-0194-021引言黄秋葵(AbelmoschusesculentusMoench)属锦葵科秋葵属，主要分布于热带、亚热带
2、及温带，在我国贵州、湖北、湖南等地栽培面积较广,有蔬菜王的称呼，经济及食用价值较高［1,2］。现代药理学研究表明，黄秋葵在养胃、抗疲劳、抗肿瘤、保护心血管及免疫调节等方面具有较好的活性［3〜5］。多糖作为植物中的一种重要生物大分子，具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等多种功能［6-8］,木文联合利用4种方法对黄秋葵多糖的体外抗氧化作用进行了研究，研究结果将为黄秋葵的综合开发利用提供理论支撑。2材料与方法2.1材料和试剂从市场上采购黄秋葵，烘干至恒重；抗坏血酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠等常规化学试剂购于北京化
3、工厂；辣根过氧化物酶（HRPaso）、1,1-二苯基-2-三硝基苯月井（DPPH）、氯化硝基四氮呼（NBT）等购于Sigmao2.2仪器与设备可见分光光度计（723型），上海光谱;电子分析天平（SL3001N）,上海民桥；冷冻干燥器，北京博医康；电热恒温水浴锅，北京泰泽瑞达。2.3黄秋葵多糖的制备称取干燥的黄秋葵500g,置于装有8L蒸憎水的容器中，100°C煮提4h,过滤；重复煮提一次，过滤，合并二次的滤液。于65°C将多糖提取液浓缩至约700mL,4500r/min离心15min,收集上清液并加入4倍体积的95
4、%乙醇，静置过夜。次日，4500r/min离心15min,收集沉淀并冻干。将冻干物复溶于700mL的蒸憾水中，并向该溶液中加入除蛋白试剂（氯仿：正丁醇=4：1）200mL,剧烈振荡2h后，于4500r/min离心15min,收集水层，重复2次后，将上清溶液冻干，即得黄秋葵多糖。2.4黄秋葵多糖的糖含量、糖醛酸含量及蛋白质含量测定分别采用苯酚-硫酸法、间疑基联苯法和考马斯亮蓝法分析多糖屮的糖、糖醛酸和蛋白质含量［9］。2.5黄秋葵多糖的抗氧化活性测定2.5.1对DPPH的清除能力将黄秋葵多糖溶于蒸谓水中，配成系列浓度
5、的溶液（0.25〜4.0mg/mL）o上述多糖溶液各取4mL与1mLDPPH甲醇溶液（0.1M）混合，混匀并避光反应20mine以蒸憾水为空白对照，抗坏血酸为阳性对照。DPPH清除率二（1-A黄秋葵多糖/A蒸倔水）X100%,其中A黄秋葵多糖和A蒸憾水为各溶液在517nm处的吸光值［10］。2.5.2对耗基自由基(?OH)的清除能力将黄秋葵多糖溶于蒸馆水中，配成系列浓度的溶液(0.25〜4.0mg/mL)o上述多糖溶液各取0.1inL,与0.4mL磷酸盐缓冲液(0.05M,pH=7.5),乙二胺四乙酸溶液(0.00
6、1M)、H202(0.01M),抗坏血酸溶液(0.002M),脱氧核糖溶液(0.06M),FeC13溶液(0.001M)各0.1mL混合，于37°C孵育1ho向溶液中继续加入TFA溶液(10%)和1.0mL硫代巴比妥酸溶液(1%)各1.0mL,于100°C孵育15mino轻基自由基(？()11)清除率二(1-A黄秋葵多糖/A蒸储水)X100%,其中A黄秋葵多糖和A蒸憾水为各溶液在532nm处的吸光值［11］。2.5.3对超氧负离子(0-2?)的清除能力将黄秋葵多糖溶于蒸馅水中，配成系列浓度的溶液(0.25〜4.0m
7、g/mL)o上述多糖溶液各取1mL,加入氯化硝基四氮哇(300uM)、还原型烟酰胺腺瞟吟二核昔酸(936uM)、吩嗪硫酸二甲酯(120uM)各1讥混合，于25°C孵育5mino超氧负离子(0-2?)清除率二(1-A黄秋葵多糖/A蒸憾水)X100%,其中A黄秋葵多糖和A蒸憾水为各溶液在560run处的吸光值［12］。2.5.4与Fe2+的螯合能力将黄秋葵多糖溶于蒸谓水中，配成系列浓度的溶液(0.25〜4.0mg/mL)o上述多糖溶液各取1mL,与0.5mLFeC12(2仙)、0.2mL菲咯嗪溶液(2mM)混合，于25
8、°C孵育15min。Fc2+螯合率二(1-A黄秋葵多糖/A蒸憎水)X100%,其中A黄秋葵多糖/A蒸镭水为各溶液在562nm处的吸光值［13］。3结果分析3.1黄秋葵多糖的制备黄秋葵多糖的制备流程如图1所示，黄秋葵用8L蒸馄水在100°C下连续煮提二次，过滤,合并二次滤液，浓缩至700mL,80%乙醇醇沉后?o置过夜，离心后的沉淀经冻干和除蛋白质后，得到浅黄
