海带多糖的体外抗氧化活性研究论文

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1、海带多糖的体外抗氧化活性研究论文周娟,吴宏,刘青,捷明【摘要】目的研究海带多糖体外抗氧化作用。方法采用体外实验研究海带多糖对羟自由基、超氧阴离子的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果海带多糖体外可清除O-2·及·OH;抑制H2O2诱导的大鼠红细胞氧化性溶血;抑制小鼠组织MDA的生成。结论海带多糖体外具有清除自由基及抗脂质过氧化的作用。【关键词】海带多糖;氧自由基;脂质过氧化;抗氧化Abstract:ObjectiveTostudytheantioxidativeactivitiesoflaminarininvitro.MethodsTheantio

2、xidantcapacityoflaminarininarinonoxygenradicalsanditsinhibitoryeffectonlipidperoxidationinarinonH2O2inducedhemolysisofraterythrocytesinarinexhibitedadosedependentinhibitoryeffectonthehydroxylfreeradicalandsuperoxideanionfreeradical.Italsoshoogenatesofthemiceliverandheartinadosedependentmanner.Th

3、eautohaemolysisofmiceredbloodcellsinarininadosedependentmanner.Conclusionlaminarinshoentsinvitro.Keyinarin;oxygenradical;lipidperoxide;antioxidation海带属海带目海带科,含有多种生物活性成分,其大部分生物活性与其中的多糖成分密切相关1。海带多糖(laminarin)是从海带中提取出来的多糖类化合物。梁桂林2等对海带多糖进行体内抗氧化研究,结果表明海带多糖在体内具有抗氧化活性。本文对海带多糖的体外抗氧化作用进行了探讨。1材料与方法1.1材料海带多

4、糖的提取、纯化及纸层析鉴定法按文献3制备。将市售干海带适度粉碎,用蒸馏水浸泡,加热提取,冷却离心,浓缩,浓缩液加入4倍体积的95%乙醇沉淀,沉淀物依次用无水乙醇、丙酮及乙醚洗涤,用蒸馏水复溶,透析,Seveg法除蛋白,常规干燥得海带多糖。纸层析分析表明,海带多糖由葡萄糖、半乳糖、木糖等组成。硫酸-苯酚法测多糖含量为85%,考马司亮蓝法测定总蛋白含量。硫代巴比妥酸购自国药集团化学试剂有限公司(批号:20080925);肝素为万邦医药(批号:0812111);抗坏血酸为福州海王福药制药有限公司产品(批号:0901042);硫酸亚铁、过氧化氢、三氯乙酸等均为市售分析纯试剂。752N紫外分光光度计(

5、上海精密科学仪器有限公司);TDL60B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);BS124S分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);HHS数显恒温水浴锅(常州市国立试验设备研究所);XHC旋涡混合器(常州市国立试验设备研究所)。实验动物为昆明种清洁级小鼠10只.freelirnoff等的方法改进4,用FeSO4+H2O2产生·OH,以·OH氧化水杨酸所得产物的吸光值表示·OH的多少,吸光值越大,·OH越多。4mL反应体系中含9mmol/LFeSO41mL,8.8mmol/LH2O21mL,9mmol/L水杨酸1mL(用50%乙醇作溶剂)及1mL不同浓度的海带多糖,最后加H2O2启动反应,3

6、7℃温浴1h,于510nm测吸光值。空白组以重蒸水代替水杨酸和海带多糖,对照组以重蒸水代替海带多糖。清除率以A0-(Ai-Ai0)/A0×100%计算,其中A0为对照,Ai为海带多糖某浓度时的吸光值,Ai0为空白组的吸光值。1.2.2海带多糖清除O-2效果的测定5每支试管加TrisHCl缓冲液(pH8.2)4.5mL,25℃预热20min,加1mL不同浓度的海带多糖,再加10mmol/L的邻苯三酚0.4mL,立即摇匀,准确反应4min,立即加入8mol/LHCl0.1mL终止反应,325nm测吸光值。空白组以重蒸水代替邻苯三酚和海带多糖,对照组以重蒸水代替海带多糖。清除率以(A0-Ai)/

7、(A0-Ai0)×100%计算,其中A0为对照,Ai为海带多糖某浓度时的吸光值,Ai0为空白组的吸光值。1.2.3海带多糖对小鼠红细胞H2O2所致溶血的影响6小鼠颈总动脉采血,肝素抗凝,4℃3000×g离心得红细胞,冷生理盐水洗3次,制成0.5%悬浮液。取红细胞悬液1mL,.freelmol/LH2O20.5mL混匀,37℃温浴1h,加生理盐水4mL,3000r/min离心5min,取上清于415nm测定其吸

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