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时间:2018-11-29
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1、天山岩黄芪根中总黄酮超声提取工艺研究论文.freelenoviiregeltHerd.MethodsThetotalflavonoidwasdeterminedbyUV-spectrometricmethod,theextractionrateofflavonoidoptimizedcondition(ethanolconcentration,ultrasonictime,solventquantityandextractiontimes)wasdeterminedbyorthogonaldesign.ResultsTheorderoffactorstoaffectt
2、heflavonoidextractionwasethanolconcentration>extractiontimes>solventquantity>ultrasonictime.ConclusionTheoptimumultrasonicextractiontechnologieswereA3B3C3D3.KeysemenoviiregeltHerd;Totalflavonoid;Orthogonaltest天山岩黄芪HedysarumsemenoviiRegeletHerd为豆科岩黄芪属(HegysarumLinn)植物,分布于新疆乌鲁木齐、伊犁、阿勒泰、塔城
3、等地区。该属植物具有补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌之功能。药理研究证明:有强心、利尿、降压、护肝、抗肾炎作用。化学成分较复杂,富含黄酮类化合物、木质素类、生物碱类、香豆苯醚类、氨基酸[1~6]、多糖类等。其中具有生物活性的黄酮类化合物具有显著的预防和治疗心血管疾病,具有抗氧化、抗衰老及增强机体免疫等功能。近年来研究表明黄酮类化合物在食品上的应用也越来越广泛,如天然色素、甜味剂、抗氧化剂等。为综合评价药材质量,本研究首次采用正交实验法考察超声提取天山岩黄芪根中总黄酮的优选提取条件。1材料与仪器天山岩黄芪6月份采自新疆乌鲁木齐东山区采后洗净、晒干、60℃烘干粉粹后过6
4、0目筛备用。由北京大学药学院天然药物学系杨虎彪教授鉴定为天山岩黄芪根HedysarumsemenoviiRegeltHerd。TU-1800型紫外可见分光光度计;SK8210HP型超声清洗机;芦丁对照品(中国药品生物品检定所);电子天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司生产);所用试剂均为分析纯。2方法[7]与结果2.1对照品溶液的制备精密称取在105℃干燥恒重的芦丁对照品20mg于100ml容量瓶中,用60%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得0.200mg/ml标准贮备液备用。2.2供试品溶液的制备精密称取天山岩黄芪根粉1g,加70%乙醇20ml,提取2次,超声提取30
5、min,过滤,摇匀。再精密吸取2ml置25ml容量瓶中,加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,备用。2.3测定波长的选择分别取对照品溶液及供试品溶液各1ml按“2.4”项下依法操作,用紫外可见分光光度计将对照品溶液及供试品溶液在200~700nm进行扫描,结果发现对照品溶液及供试品溶液在357nm附近有最大吸收峰,实验中选择测定波长为357nm。2.4线性关系考察精密量取对照品溶液0.1,0.2,0.4,0.5,0.6,0.8ml置5ml容量瓶中加乙醇稀释至刻度,摇匀,制成含芦丁4~32μg/ml的系列标准溶液。以乙醇为空白,在357nm波长处测定其吸光度,结果表明芦丁在4~
6、32μg/ml范围内符合Beer定律,吸光度与浓度呈良好的线性关系,其回归方程为:A=17.63C+0.0469,r=0.99962.5提取物中总黄酮含量的测定精密吸取供试品约10ml于离心试管中,离心4000r/min,10min,取上清液5.0ml按“2.4”项下方法处理,测定吸光度值,代入回归方程,计算总黄酮含量。2.5.1不同乙醇浓度对提取效果的影响以分别以30%,50%,70%,90%乙醇溶液15ml对1g天山岩黄芪根提取两次,20min/次,结果所得总黄酮的浓度为0.2310%,0.2654%,0.4247%,0.4565%,表明天山岩黄芪根在70%乙醇溶
7、液提取效果较好。2.5.2不同时间对提取效果的影响溶剂量为15ml,乙醇浓度为70%,提取两次,分别用10,20,30,40min,结果所得总黄酮的浓度为0.3754%,0.3851%,0.4212%,0.4328%,表明天山岩黄芪在提取时间30min效果好。2.5.3不同体积的乙醇对提取效果的影响分别用20,30,40,50,60ml浓度为70%乙醇溶剂提取天山岩黄芪,20min/次,提取两次,结果所得总黄酮的浓度为0.4528%,0.4912%,0.5823%,0.4123%,0.3872%,表明天山岩黄芪在提取溶剂为30ml效果较好。2.5.4
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