海藻提取物fucoidan抗肿瘤作用的实验研究

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1、海藻提取物Fucoidan抗肿瘤作用的实验研究【摘要】目的研究海藻提取物Fucoidan抗肿瘤作用，并对其机制进行初探。方法观察Fucoidan对小鼠S180移植性实体瘤、体外培养肿瘤细胞的作用，并了解其对动物免疫功能的影响。结果Fucoidan能明显抑制小鼠S180实体瘤的生长（P<0.01），且呈现剂量相关性，其抑瘤率达到环磷酰胺阳性对照的70.4%～78.2％，对体外培养A549细胞、HeLa细胞和L1210细胞的生长均无显著抑制作用，Fucoidan中剂量组和大剂量组能显著提高碳粒廓清实验中的廓清指数K、吞噬指数α和脾脏器指数（P<0.

2、05或P<0.01），但对胸腺脏器指数影响不大。在DNFB诱导迟发性变态反应实验中，Fucoidan中剂量组和大剂量组亦可使小鼠耳肿胀度增大。结论Fucoidan具有抗肿瘤作用，其机制可能是通过对免疫功能的增强来实现的。【关键词】海藻提取物褐海藻多糖硫酸酯；抗肿瘤　　Abstract：ObjectiveToobservetheantitumoractionofFucoidanextractedfrombroodeofimplantedS180tumorice.TheinhibitoryeffectontumoriceafterFucoidanetho

3、dofMTTmunefunctionofFucoidantonormalmiceentontheclearancerateofcharcoalparticlesanddelayedtypehypersensitivereaction(DTH)inducedbyDNFB.ResultsFucoidanshoorinadose-dependentmanner（P<0.01）,butnosignificantanti-proliferativeeffectsonA549,HeLaandL1210cells.Theclearancerateofcharcoa

4、lparticles,spleenindexandearedemainducedbyDTHprovedinhigh-doseandmiddle-dosegroups（P<0.05;P<0.01）.ConclusionFucoidanhasantitumoraction,andthemechanismmayberelatedtostrengtheningtheimmunefunction.　　KeyBroorFucoidan是一种从日本褐藻Undariapinnatifida中提取的天然多糖类成分，含有4-单邻磺酸-L-岩藻吡喃糖（4-mono-

5、O-sulfo-L-fucopyranose）。现有研究证明，从多种褐藻中提取的Fucoidan具有多种生物效应，如抗肿瘤、抗凝血、抗病毒等，已在日本作为功能食品、化妆品等广泛使用［1］。其抗肿瘤作用尤引起人们的关注。本实验以体内、体外方法，观察Fucoidan对小鼠S180移植性实体瘤、体外培养肿瘤细胞的作用，并了解其对动物免疫功能的影响，以对其抗肿瘤机理进行探讨，为其临床应用提供基础。　　1材料　　1.1药品与试剂　　Fucoidan由武汉和利有限公司提供，为黄褐色粉末，在水溶液中溶解度好。环磷酰胺：山西普德药业有限公司生产。Ⅳ型胶原酶、噻唑蓝（MTT

6、）、放线菌素D、脂多糖（LPS）：购自Sigma公司；RPMI-1640培养基、新生牛血清（NBS）：GIBCO公司生产。　　1.2动物及分组　　昆明种小鼠（湖北省实验动物中心提供），18～22g，雌雄各半。体内抗肿瘤活性的检测实验将小鼠随机分为模型组，Fucoidan小、中、大剂量组及阳性对照组共5组，每组20只；对小鼠免疫功能的影响将小鼠随机分为对照组，Fucoidan小、中、大剂量组共4组，每组10只。Fucoidan小、中、大剂量组分别按1，2，3mg/10g灌胃给药，对照及模型组和阳性对照组同法给予等量生理盐水和0.3mg/10g环磷酰胺，1次/

7、d。　　1.3瘤株　　A549细胞（人肺癌上皮细胞系）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）、L1210细胞（小鼠淋巴细胞性白血病细胞）：由武汉大学典藏中心提供；荷瘤S180腹水型小鼠：由华中科技大学同济医学院提供。　　2方法　　2.1体内抗肿瘤活性的检测［2］　　模型组和Fucoidan各组按剂量要求预防性灌胃给药7d。第7天给药后1h，由荷瘤S180腹水型小鼠体内无菌抽取腹水，显微镜下计数，以无菌生理盐水调整肿瘤细胞数至2.5×1010/L，混匀后，每鼠右腋皮下注射肿瘤细胞悬液0.2ml。各组如前给药，连续2周，最后1次给药24h，动物处死，并剖取各组动物

8、皮下肿瘤，称重。与模型组比较，计算抑瘤率。　　2.2体外抗肿瘤活性