地锦草槲皮素提取工艺研究

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1、地锦草槲皮素提取工艺研究作者：周玉平，吴玉娣，张纪兴【摘要】目的对地锦草的提取工艺进行研究。方法采用正交试验法，以槲皮素的含量为考察指标进行试验。结果用地锦草重量10倍量的体积分数为75%的乙醇作为提取溶剂，提取2h，共提取3次为最佳方案。结论提取方法操作简单、方便，为地锦草槲皮素提取工艺的进一步研究提供了依据。【关键词】地锦草；槲皮素；提取工艺；正交试验　　Abstract:ObjectiveOptimumextractiontechnologyoftriterpeneacidsofmedicineHerbaeuphorbiaeHumifus

2、aeentdesignoftriterpeneacidsofherbaeuphorbiaehumifusaeadeusingorthogonalfromL9（34）.Thefourfactors，thedataofalcoholconcentration，extractivetime;addingsolventvolumeandextractivetimeseachofthefourfactorsentresultsshoumextractivetechnologyofcoarsepoifusaeaddingten-timevolumeof75

3、%ethanolandthenrefluxextractingfor2.0handextracting3timesethodissimple，convenient,andthisextractionprocedureishelpfulforfurtherstudyofextractiontechnologyoftriterpeneacidsofHerbaeuphorbiaeHumifusae.　　Keyifusae;triterpeneacids;extractivetechnology;orthogonaltest　　地锦草Herbaeuph

4、orbiaeHumifusae为大戟科双子叶一年生草本植物，全草入药，具有凉血止血、清热止痢、通乳汁、清热解毒、利湿退黄、凉血止血等功效，用于治疗痢疾、外伤出血、乳汁不足、肠炎、咳血、便血、崩漏等症［1］。地锦草主要含槲角素甙及素、山素甙及素、地锦草素的黄酮类化合物［2］，药理研究证实槲皮素、山柰素等黄酮类化合物是地锦草抗菌、止血、抗氧化的主要有效成分，地锦草煎剂、醇提取液及地锦草素均有抗菌止血等作用［3］。为研究地锦草的有效成分，探索地锦草槲皮素提取的最适条件，本文以槲皮素为考察指标，采用正交试验方法对地锦草槲皮素提取工艺进行了研究。　　1仪

5、器与试药　　　　高效液相色谱仪：LC-10Avp紫外检测器，LC-10ATvp泵（日本岛津公司）；FA1104N型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；数显恒温水浴锅（金坛富华仪器有限公司）；GZX-9240MBE型电热恒温鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。　　　　槲皮素对照品(008129304，中国药品生物制品检定所)；地锦草，为HerbaeuphorbiaeHumifusae的干燥全草；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1正交试验设计　　　　依据对地锦草醇提工艺的预实验情况及槲皮素的理

6、化性质［4］，确定以提取溶剂乙醇的体积分数、提取时间、提取溶剂乙醇用量以及提取的次数为考察因素，每个因素设立3个水平(见表1)。采用L9(34)正交试验设计表，以地锦草提取物中槲皮素的含量为考察指标进行试验。　　2.2样品溶液的制备　　　　取地锦草药材粗粉精密称取9份，每份5.0g，按L9(34)组合试验条件进行加热回流提取，合并滤液，备用。　　2.3槲皮素的含量测定方法　　表1正交试验因素水平表（略）　　Tab.1Factorsandlevels　　2.3.1色谱条件岛津ODS色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：乙腈-20.4%

7、磷酸(体积比40∶60)，流速1.0mL·min-1，检测波长370nm。　　2.3.2对照品溶液制备精密称定槲皮素对照品适量，加甲醇溶解，制成每1mL含0.1mg槲皮素的对照品贮备液。精密吸取1mL贮备液，置10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，即为对照品溶液。　　2.3.3标准曲线的绘制取对照品溶液分别进样3、6、9、12、15、18μL，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，槲皮素进样量为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为:Y=3815.96X-5.61，r=0.9996。槲皮素的质量浓度在0.03～0.18μg/mL范围内具有良好的线性关系［

8、5］。　　2.3.4样品测定取上述按L9(34)组合试验条件进行试验所制备的样品液，过滤，取滤液用高效液相法进行测定，并计算各种提取条件下槲皮素的含量