地锦草分散片中槲皮素的含量测定-论文.pdf

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1、地锦草分散片中槲皮素的含量测定温颖婉/广州市药品检验所五分所【摘要】目的:采用高效液相色谱法测定地锦草分散片中槲皮素的含量。方法:色谱柱PhenomenexLunaC18(4.6mm×250mm，5μm)，柱温35℃，流动相为甲醇－1g/L磷酸溶液(50:50)，流速1.0mL/min，检测波长360nm。结果:地锦草分散片中槲皮素的的线性范围为44.8～448.0ng，加样回收率为99.2%(n=6)。结论:高效液相色谱法测定地锦草分散片中槲皮素的含量，具有分离效能高、灵敏、准确等优点，可用于地锦草分散片中槲皮素的含量测定和产品质量控制。【

2、关键词】地锦草分散片；槲皮素；测定方法；高效液相色谱法地锦草分散片收载于中华人民共和国卫生部药品标准《中药成方制剂》第十册中，是由地锦草提取制成的单方制剂。地锦草主要含黄酮类成分，可用于治疗细菌性痢疾、肠炎和秋季腹泻。地锦草为大戟科植物地锦或斑地锦的干燥全草，具有抗氧化、抗菌、止血、抑制肾功能损伤等作用［1］，现代药理研究表明地锦草中槲皮素成分具有抗菌、消炎、抗病毒、抗氧化作用，是本方发挥疗效的主要有效成分之一。1药品、试剂与仪器地锦草分散片，由河北安国药业集团有限公司(批号066303)提供[1]。槲皮素对照品，购自中国食色谱纯，德国Mer

3、ck公司产品；水为超纯水，临用新制；其他试剂为分析纯。Waters2695高效液相色谱仪、2487紫外检测器，均为美国Waters公司产品；PhenomenexLunaC18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱，广州菲罗门科学仪器有限公司产品；Milli－QAdvantageA10型超纯水机，默克密理博公司产品。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱PhenomenexLunaC18(4.6mm×250mm，5μm)；以甲醇－1g/L磷酸溶液(50:50)为流动相；柱温35℃；检测波长为360nm；进样量10μL。理论板数按槲皮素计算应不低于2

4、000，色谱图见图1。图1地锦分散草片HPLC图2.2对照品溶液的制备精密称取槲皮素对照品约10mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取5mL，置50mL量瓶中，加800g/L甲醇稀释至刻度，摇匀，即得[2]。2.3供试品溶液的制备取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，过3号筛；取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入800g/L甲醇25mL，密塞，称定质量；加热回流1h，放冷，再称定重量；用800g/L甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10mL，加入盐酸1mL，置水浴中回流1h，取出，迅速冷却，转移至2

5、5mL量瓶；加800g/L甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.4线性关系考察分别吸取精密取槲皮素对照品溶液(22.4mg/L)2，5，8，10，15，20μL，注入液相色谱仪，测定峰面积[3]。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程为Y=4477X－67655(r=0.9996)。结果表明，槲皮素在44.8～448.0ng范围内线性关系良好。2.5精密度试验精密吸取对照品溶液10μL，重复进样6次，测定峰面积。结果:槲皮素峰面积的RSD为1.0%(n=6)。结果表明，仪器精密度良好。2.6稳定性试验精密吸取供试品溶液10μL，

6、每2h进样1次，共进样6次，测定峰面积。结果:槲皮素峰面积的RSD为1.6%(n=6)。结果表明，10h内测定结果稳定。2.7重复性试验取同一样品，按2.3项下方法制备6份供试品溶液并测定。结果:槲皮素含量的RSD为1.9%(n=6)。结果表明，该方法重复性良好[4]。2.8回收率试验取同一批号已知含量供试品(批号为060302，槲皮素含量为0.5294mg/g)，除去糖衣，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，分别精密加入槲皮素对照品溶液(10.75mg/L)25mL，按照2.3项下方法制备加样回收供试品溶液，测定槲皮素含量，并计算加样回

7、收率。结果:平均回收率为99.2%，RSD为0.9%(n=6)。结果表明，该方法准确性较好。见表1。表1槲皮素回收率试验表2.9样品测定按2.3项下方法制备样品溶液，测定3批地锦草片中槲皮素的含量，测定结果见表2。表2不同批次样品中槲皮素的含量3讨论通过试验测定，地锦草中主要含黄酮类成分，考察了700g/L乙醇、800g/L甲醇、甲醇等溶剂，结果800g/L甲醇提取效率较高，且后续处理方便，因此采用800g/L甲醇作为提取溶剂；对比了超声法与回流法两种提取方法，结果二者无显著差异；比较了不同加酸量、水解时间，根据试验结果，选用加酸1mL，加热

8、水解1h来制备供试品溶液。参考文献[1]中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准:中药成方制剂:第十册［S］．1995:51[2]孟淑君，熊凌.