hplc法测定感冒清热颗粒中葛根素的含量论文

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1、HPLC法测定感冒清热颗粒中葛根素的含量论文【摘要】目的应用HPLC法对感冒清热颗粒中葛根素进行含量测定。方法选用HypersilC18色谱柱（5μm，100mm×4.6mm），甲醇-水（22：78）为流动相，检测波长为250nm，流速为1.0ml/min。结果线性范围为0.1384～1.384μg（r=0.9997），平均回收率为99.84%，RSD=1.65%。结论本法简便、灵敏、准确。【关键词】HPLC感冒清热颗粒葛根素【Abstract】ObjectiveTodeterminecontentofpuerarininGanmaoqingregranulebyHPLC.Meth

2、odsHypersilC18（5μm,100×4.6mm）obilephase,andit′sflol/min,ining.ResultsThelinearityrangeethodissimple,sensitive,andaccurative.【KeyaoqingreGranule;Puerarin感冒清热颗粒由荆芥穗、苦地丁、葛根等11味中药制成，具有疏风散寒、解表清热的功效.freel，100mm×4.6mm）；流动相：甲醇-水（22：78）；检测波长：250nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min。2.2溶液的配制精密称取在五氧化二磷中干燥18h的葛根素对照品0.06

3、92g，置50ml量瓶中，加30%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（0.1384mg/ml）。取本品适量研细，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加30%乙醇20ml,称定重量，超声处理30min，取出，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液作为供试品溶液。按处方比例及生产制备方法，制备不含葛根素的阴性样品，照上述供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。2.3选择性试验按上述色谱条件，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各5μl，注入色谱仪，结果见图1。样品中葛根素峰与杂质峰完全分离，阴性对照无干扰。2

4、.4线性关系的考察精密吸取对照品溶液（0.1384mg/ml）1、2、4、6、8、10μl进样测定，以葛根素的进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为A=3876.9859C-53.9350,r=0.9997。说明葛根素在0.1384～1.384μg。2.5精密度试验精密吸取同一对照品溶液5μl，重复进样5次，测定其峰面积积分值，结果得RSD=0.78%。2.6稳定性试验分别精密吸取同一供试品溶液10μl，于0、1、2、4、8、24h进样，测定其葛根素峰面积积分值。结果表明，供试品溶液在24h内峰面积积分值基本稳定，RSD=2.12%。2.7重复性试

5、验取同一批号样品5份，分别按上述条件，测定其葛根素含量。结果平均含量为1.346mg/g,RSD=0.83%。2.8加样回收率试验精密称取已知含量的样品（1.346mg/g）约0.5g，共6份，分别精密加入葛根素对照品溶液（0.712mg/ml）0.8、0.8、1.0、1.0、1.2、1.2ml，然后按上述方法制备供试品溶液，并测定其含量，结果平均回收率为99.84%，RSD=1.65%，见表1。表1回收率试验结果2.9样品测定结果取不同批号的样品1.0g，按2.2项下方法制得供试品溶液，以上述色谱条件测定，以外标法计算样品中葛根素的含量，结果见表2。表2样品中葛根素含量测定结果3

6、讨论曾试验考察分别用30%乙醇、乙醇和甲醇提取对葛根素含量的影响，结果以30%乙醇为提取溶剂效果最好，其葛根素含量最高。曾试验考察超声提取时间（10、30、60min）对葛根素含量的影响，结果分别为：1.21、1.28、1.28mg/g。表明样品在超声提取30min后葛根素含量已基本提取完全。文中葛根素的含量测定，样品处理简单，色谱分离效果良好，精密度高，准确可靠，可用于该制剂的质量控制。【