紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量

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1、紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量【摘要】［目的］探讨翻百草中总黄酮含量的测定方法.［方法］以硝酸铝、亚硝酸钠及氢氧化钠为显色剂,利用紫外分光光度计测定翻白草中总黄酮的含量.［结果］最佳检测波长为510nm，芦丁质量浓度在20～50mg/L范围内时，吸收度与质量浓度呈良好的线性关系，回归方程为y=7.7457x+0.0009(r=0.9996)，平均回收率为99.52%，RSD为1.23%.［结论］采用紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量简便易行，结果稳定可靠.【关键词】黄酮类分光光度法紫外线植物药用ABSTRACT:OBJECTIVETost

2、udyassaymethodoftotalflavanonecontentinPotentilladiscolorbunge.METHODSogenicagent,totalflavanonecontentofPotentilladiscolorbungeisdeterminedbyultravioletspectrophotometry.RESULTSTheoptimaldetective,andabsorbabilityandmassconcentrationassconcentrationofruting/L.Theregressionequa

3、tionetrytodetecttotalflavanonecontentinPotentilladiscolorbungeissimple,accurate,andsensitive.Keyetry,altravionlet;plants,medicinal翻白草（Potentilladiscolorbunge）为蔷薇科植物的干燥全草，含鞣质，植株各部分均含黄酮类化合物［1］，具有降低血脂、抗菌、止泻和增强免疫功能的作用［2］.本研究采用紫外分光光度法对翻白草中总黄酮的含量进行了测定，旨在为翻白草药材及制剂的质量控制提供科学依据.1材料翻白草全草采

4、集于吉林省龙井市铜佛寺镇，经延边大学药学院生药学教研室吕惠子副教授鉴定为正品翻白草；芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所.电子天平及753型紫外分光光度计均为上海精密科学仪器有限公司产品；REE52C型水浴锅为北京市医疗设备总厂产品；旋转薄膜蒸发器为上海亚荣生化仪器厂产品；202型电热鼓风恒温干燥箱为江苏恒丰仪器厂产品.试剂均为AR级.2方法与结果2.1对照品溶液的制备精确称取在105℃条件下干燥至恒定质量的芦丁标准品10.0mg，置于100mL容量瓶中，加入700mL/L乙醇适量，微热溶解，放冷后再加入700mL/L乙醇稀释至刻度，摇匀，得质量浓

5、度为0.10g/L的芦丁对照品溶液，低温保存，备用.2.2供试品溶液的制备精确称取翻白草100g，用700mL/L乙醇回流提取，回收溶剂得浸膏.将浸膏用适量水溶解，乙醚脱脂，置于冰箱中冷却，有绿色沉淀产生，将过滤得到的滤液浓缩，干燥得到棕黄色粉末.准确称取已于105℃条件下烘干至恒定质量的黄酮样品20.0mg，用700mL/L乙醇定容至100mL.2.3测定波长的选择精确量取对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别置于25mL容量瓶中，加入50g/L亚硝酸钠溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加入100g/L硝酸铝溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加入

6、40g/L氢氧化钠溶液10.0mL，再加入水至刻度，摇匀，放置15min，在波长为200～700nm范围内扫描，结果2种溶液均在510nm处有最大吸收，其他成分对测定无干扰.2.4标准曲线的绘制分别精确吸取芦丁标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于25mL容量瓶中，加入50g/L亚硝酸钠溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加入100g/L硝酸铝溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加入40g/L氢氧化钠溶液10.0mL，加入700mL/L乙醇至刻度，摇匀，放置15min，进样，于波长为510nm处测定吸收值（用不含芦丁的空白管对照调零

7、）.得回归方程：y=7.7457x+0.0009（r=0.9996），结果表明，测定芦丁质量浓度在20～50mg/L范围内呈良好的线性关系.2.5精确度实验取对照品溶液于510nm波长处测定吸收值5次.结果示平均吸收值为0.252，RSD为0.54%（n=6），表明该方法精确度良好.2.6稳定性试验取供试品溶液，于0、10、30、60、90、120min时测定吸收值.结果表明，总黄酮与铝离子形成的红色络合物在1h内稳定，RSD为1.21%（n=6）.2.7重现性试验精确称取药材样品1.0g，共5份，平行试验，于510nm波长处测定吸收值，结果见RSD

8、为3.03％.2.8加样回收率实验精确称取于105℃条件下干燥至恒定质量的芦丁对照品100mg，置于100m