ssr标记技术在种子纯度鉴定中的研究进展

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1、SSR标记技术在种子纯度鉴定中的研究进展　　论文关键词：种子纯度　SSR标记　研究进展　　论文摘要：种子纯度在种子生产中的地位日益提高，以往的形态鉴定等方法难以满足人们的要求。随着分子标记技术的发展，越来越多地被应用到种子纯度鉴定中。本文介绍了SSR分子标记技术的基本原理和特点，简要叙述了SSR标记技术在农作物种子纯度鉴定上的研究进展，并就其在杂交种纯度方面的应用潜力进行了探讨。　　Keyarkers;Researchprogresses　　Abstract：ThestatusofSeedpurityareincreasedinseedproduction

2、.Itisdifficulttomeetpeoplethatthemethodsofpastidentifications.entofmolecularmarkers,SSRareappliedtotheidentificationofseedpurityincreasingly.Inthispaper,SSRmolecularmarkertechnology,thebasicprinciplesandcharacteristicsaresummarized.ItisdescribedtheresearchprogressesofSSRmarkersint

3、hepurityofcropseed.And,itisdiscussedthepotentialapplicationsinthepurityofhybrid.　　1.前言　　随着我国农业经济的发展和种子市场的逐步规范，种子的真假和纯度对种子生产具有越来越重要的影响。为了保护农民以及育种者的利益，发展快速、稳定、可靠的品种纯度鉴定方法具有重要的意义。种子品种纯度鉴定主要包括品种真实性和品种纯度鉴定两个方面。品种鉴定主要指对供检样品的真实性进行鉴定。品种纯度就是对品种的一致性进行分析。种子纯度是种子质量的核心指标，是衡量种子质量的主要标准，种子纯度的高低对农

4、业生产的产量和品质有较大的影响，因此在种子生产、加工、贮藏和经营贸易中有重要的意义，历来受到种子管理部门、种子生产者和用种者的密切关注。　　品种纯度检验的方法很多，有籽粒形态鉴定，幼苗鉴定，蛋白质电泳鉴定和田间小区种植鉴定等〔1〕，但这些方法均有不足之处。籽粒形态鉴定可以鉴别性状差异明显的，但这种差异性状较少，准确性差；幼苗鉴定适用于性状表现差异较大的品种，能够鉴定的品种少；蛋白质电泳由于遗传种质资源的狭窄，品种间的差异越来越小，难以鉴定。纯度鉴定最可靠的方法是田间小区种植鉴定，但是这种方法需要一个生长季节，时间较长，耗费较多的人力物力。而且上述方法受人为

5、因素的影响较大，导致检测结果产生误差。为了克服这些缺陷，人们不断地探索新的方法。　　随着科学技术的进步，分子生物技术逐渐应用于品种纯度的检验，以遗传物质DNA为基础的分子标记技术也逐渐受到人们的亲睐。DNA分子标记技术本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片段〔2〕，由于其快速、准确、可靠、不受环境因素的影响，越来越多地被应用到种子纯度检测中。　　SSR是近年来发展起来的一种DNA分子遗传标记技术，是建立在PCR（PolymeraseChainReaction）基础上的，在植物基因组中的应用非常活跃，已被广泛应用于基因定位，种子进化

6、及遗传多样性的研究〔3〕。目前，SSR技术由于其具有数量丰富，多态性高，呈显性遗传等特点，在种子纯度检测中得到广泛应用。　　2.SSR标记的原理及特点　　2.1SSR标记的原理　　SSR（SimpleSequenceRepeat，简单重复序列）又称微卫星DNA，是一类由几个（多为1～6个）核苷酸为单位串联重复而成的DNA序列，长度一般在100bp以内，较短〔4〕。这些短的串联重复是在DNA复制过程中，由于DNA滑动、复制时，滑动链与互补链碱基错配，而产生的一个或几个重复单位的插入或缺失。Valdas等认为，每一次突变都会增加一个或几个重复单位，从而导致新的

7、等位基因的出现[5]。　　微卫星DNA是一种非常活跃的碱基序列，广泛分布于各类真核生物基因组的不同位置，而且分布比较均匀，能参与遗传物质的结构改变，基因调控及细胞分化等过程，有自身特异性结合蛋白，还能直接编码蛋白质[6]。微卫星基因序列中，重复基因的重复次数不同，且重复的基因序列不同，产生了简单序列长度多态性和随机扩增微卫星多态性，从而反映高度的等位基因多样性。由于微卫星位点两侧的DNA序列较为保守，根据两侧的这个保守序列设计特定的引物，并通过PCR扩增，将其间的核心卫星DNA序列扩增出来，结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，就可以对这些多态性进行比较分析。　　2

8、.2SSR标记的特点　　SSR技术采用PCR进行检测，所需DNA样