附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究论文

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1、附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究论文刘萍，黄川锋，李玲，阮耀【摘要】目的研究附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾功能和形态学的影响。方法取健康SD大鼠40只随机分为正常组(A组)、附子组(B组)、贝母组(C组)、附子与贝母合用组(D组)，每组10只。各组每日分别按2.5g/kg灌胃给予生理盐水、附子煎液、贝母煎液、附子与贝母混合煎液，给药组浓度均为200g/L。第14天停药，称重，采集心脏、肝脏及肾脏标本.freelcarmchaeliDebx)的子根加工品，朱林平5认为附子与乌头同出一源，故其也不宜与此5味

2、药物配伍。本实验通过观察附子与贝母(Fritillary)单用及配伍应用后大鼠体重增长率的变化、心、肝、肾脏器指数及形态学改变，检测心肌酶谱、肝功能、肾功能部分生化指标，从而对附子与贝母配伍是否具有毒性及毒性作用的靶器官进行探讨。1材料1.1动物健康雄性SD大鼠，SPF级，体质量180～200g，购自华中科技大学同济医学院实验动物学部，合格证号scxk(鄂)2004-0007。1.2仪器及设备BM-Ⅷ生物组织包埋机、冷冻台(孝感市宏业医用仪器有限公司);DMR+Q550型病理图像分析仪(德国Leica公司);日本

3、Olympus万能显微镜;日立7179全自动生化分析仪。1.3药物白附片、贝母，购自河南省宛西制药股份有限公司仲景大药房，由南阳医学高等专科学校生药学袁国卿副教授鉴定。附子单煎40min，贝母单煎20min，附子与贝母配伍用药时先将白附片煎20min后加入贝母合煎20min。药物浓度均为200g/L，晾凉后置于冰箱冷藏室中备用。1.4试剂LDH(乳酸脱氢酶，批号：071121)、CK(肌酸激酶，批号：080391)、ALT(丙氨酰氨基转移酶，批号：080375)、AST(天门冬氨酸氨基转移酶，批号：080381)

4、、BUN(血清尿素氮，批号：071275)及Cr(血肌酐，批号：080375)，均为中生北控生物科技股份有限公司生产。2方法2.1分组取SD大鼠40只，随机分为正常对照组(A组)、附子组(B组)、贝母组(C组)、附子与贝母合用组(D组)，每组10只，称重，标记。各组每日分别用灌胃法给予2.5g/kg生理盐水、附子煎液、贝母煎液及附子与贝母混合煎液，各给药组浓度均为200g/L。于4，8，12d各称重一次并调整给药剂量。第14天停药，禁食不禁水12h后，称重，用100g/L的水合氯醛麻醉后，解剖、暴露出心脏，自左心

5、室取血5ml制备血清，测定各组血清LDH，CK，AST，ALT，BUN，Cr含量;分离心脏、肝脏及肾脏，用生理盐水冲洗后称重，用中性缓冲福尔马林溶液固定，通过脱水透明、浸蜡包埋、切片与贴片、脱蜡HE染色、脱水透明、封固，于光学显微镜下观察形态学改变。2.2统计方法实验数据采用SPSS13.0统计软件分析处理，结果以±s表示，组间比较采用F检验进行整体方差分析，方差齐者用q检验，方差不齐者用秩和检验，P0.05有显著性差异，P0.01有极显著性差异。3结果3.1体质量及脏器指数(见表1)从表1可见，体质量增长率、肝

6、脏指数各间均无显著差异(P0.05)，D组心脏指数显著高于B、C组(P0.01)，D组肾脏指数明显高于C组(P0.05)。表1各组体质量增长率及心、肝、肾脏指数(±s)3.2形态学观察3.2.1心肌形态学见图1。对照组结构正常;附子组心肌间隙明显宽大，肌束细长，肌纤维粗细不等，少许区域肌浆有融合现象，间质中可见个别炎细胞浸润;贝母组心肌纤维之间间隙明显扩大，肌丝粗细不等，肌浆融合，间质出血，炎细胞浸润明显;附子+贝母组心肌肌束断裂，肌纤维结构消失，部分肌纤维融合，胞浆同质状，周边部蛋白液渗出，炎细胞浸润明显。图1

7、各组心肌形态学改变(HE，400×)3.2.2肝脏形态学见图2。对照组结构正常;附子组肝小叶结构略显紊乱，肝索上细胞排列不规则，可见较多慢性炎症细胞浸润，肝细胞水肿，细胞核大深染，可见双核;贝母组汇管区可见大量炎细胞浸润，部分肝细胞变性;附子+贝母组大部分小叶结构正常，可见2～3个细胞体积大，核大深染，并可见双核肝细胞。3.2.3肾脏形态学见图3。对照组结构正常;附子组肾近曲小管上皮细胞水肿，界限不清，小血管扩张充血，间质可见蛋白样水肿液，间质炎细胞浸润明显;贝母组肾小球数目减少，管腔扭曲不规则，间质灶性纤维化，

8、结构紊乱，炎细胞浸润明显;附子+贝母组肾小管明显扩张，中央视野可见肾小球玻璃样变性，内有出血，周边部可见少许内皮细胞，间质炎细胞浸润明显。图2各组肝脏形态学改变(HE，400×)3.3生化指标结果见表2。与对照组相比，附子组LDH，BUN，Cr明显升高(P0.05或P0.01)。附子、贝母合用组与附子、贝母单用组相比，各检测指标与相应的比较组间均无明显差异(P0.05)。