附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究

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1、附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究作者：刘萍，黄川锋，李玲，阮耀【摘要】目的研究附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾功能和形态学的影响。方法取健康SD大鼠40只随机分为正常组(A组)、附子组(B组)、贝母组(C组)、附子与贝母合用组(D组)，每组10只。各组每日分别按2.5g/kg灌胃给予生理盐水、附子煎液、贝母煎液、附子与贝母混合煎液，给药组浓度均为200g/L。第14天停药，称重，采集心脏、肝脏及肾脏标本，计算体质量增长率及心、肝、肾脏指数并观察其形态学改变;心脏取血，测定各组血清LDH，CK，AST，ALT，BUN，Cr含量

2、。结果体重增长率、肝脏指数各组间均无显著差异;心脏指数D组比A、B、C组有显著升高，肾脏指数D组比C组有显著升高;形态学方面各给药组心肌、肝脏、肾脏均可见不同程度的损伤;AST、ALT的变化各组间无显著性差异，和A组相比，各组LDH明显升高，B组、D组BUN、Cr明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论给药剂量为2.5g/kg时，单用附子、贝母对大鼠均有显著的心脏、肝脏和肾脏毒性;附子与贝母配伍用药后对大鼠心、肝、肾脏毒性较单用组明显提高。【关键词】附子;贝母;中药;十八反;毒理学“十八反”10是中药药性理论的重要组

3、成部分，是中医界沿袭数千年的用药禁忌，为历代医家所推崇，目前仍被《中国药典》和各类教科书所遵循。但近年也有学者报道，部分相反、相畏中药在临床实践中使用后并未发现明显毒副作用，反而有相反相成的作用。因此，“十八反”也是现代药性理论研究争议的焦点问题。目前关于半蒌贝蔹及攻乌的研究较多[1～4]。附子(RadixAconitilateralisPreparata)为毛莨科植物乌头(AconitumcarmchaeliDebx)的子根加工品，朱林平[5]认为附子与乌头同出一源，故其也不宜与此5味药物配伍。　　本实验通过观察附子与贝母(Fri

4、tillary)单用及配伍应用后大鼠体重增长率的变化、心、肝、肾脏器指数及形态学改变，检测心肌酶谱、肝功能、肾功能部分生化指标，从而对附子与贝母配伍是否具有毒性及毒性作用的靶器官进行探讨。　　1材料　　1.1动物健康雄性SD大鼠，SPF级，体质量180～200g，购自华中科技大学同济医学院实验动物学部，合格证号scxk(鄂)2004-0007。　　1.2仪器及设备BM-Ⅷ生物组织包埋机、冷冻台(孝感市宏业医用仪器有限公司);DMR+Q550型病理图像分析仪(德国Leica公司);日本Olympus万能显微镜;日立7179全自动生化分

5、析仪。10　　1.3药物白附片、贝母，购自河南省宛西制药股份有限公司仲景大药房，由南阳医学高等专科学校生药学袁国卿副教授鉴定。附子单煎40min，贝母单煎20min，附子与贝母配伍用药时先将白附片煎20min后加入贝母合煎20min。药物浓度均为200g/L，晾凉后置于冰箱冷藏室中备用。　　1.4试剂LDH(乳酸脱氢酶，批号：071121)、CK(肌酸激酶，批号：080391)、ALT(丙氨酰氨基转移酶，批号：080375)、AST(天门冬氨酸氨基转移酶，批号：080381)、BUN(血清尿素氮，批号：071275)及Cr(血肌酐，

6、批号：080375)，均为中生北控生物科技股份有限公司生产。　　2方法　　2.1分组取SD大鼠40只，随机分为正常对照组(A组)、附子组(B组)、贝母组(C组)、附子与贝母合用组(D组)，每组10只，称重，标记。各组每日分别用灌胃法给予2.5g/kg生理盐水、附子煎液、贝母煎液及附子与贝母混合煎液，各给药组浓度均为200g/L。于4，8，12d各称重一次并调整给药剂量。第14天停药，禁食不禁水12h后，称重，用100g/L的水合氯醛麻醉后，解剖、暴露出心脏，自左心室取血510ml制备血清，测定各组血清LDH，CK，AST，ALT，B

7、UN，Cr含量;分离心脏、肝脏及肾脏，用生理盐水冲洗后称重，用中性缓冲福尔马林溶液固定，通过脱水透明、浸蜡包埋、切片与贴片、脱蜡HE染色、脱水透明、封固，于光学显微镜下观察形态学改变。　　2.2统计方法实验数据采用SPSS13.0统计软件分析处理，结果以±s表示，组间比较采用F检验进行整体方差分析，方差齐者用q检验，方差不齐者用秩和检验，P<0.05有显著性差异，P<0.01有极显著性差异。　　3结果　　3.1体质量及脏器指数(见表1)从表1可见，体质量增长率、肝脏指数各间均无显著差异(P>0.05)，D组心脏指数

8、显著高于B、C组(P<0.01)，D组肾脏指数明显高于C组(P<0.05)。　　表1各组体质量增长率及心、肝、肾脏指数(±s)　　3.2形态学观察　　3.2.110心肌形态学见图1。对照组结构正常;附子组心肌间隙明显宽大，