养血定颤方对帕金森病大鼠行为学、多巴胺能神经元和自由基损伤的影响论文

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1、养血定颤方对帕金森病大鼠行为学、多巴胺能神经元和自由基损伤的影响论文【摘要】目的：探讨养血定颤方治疗帕金森病的作用及机制。方法：采用6羟基多巴胺单点注射法制备帕金森病大鼠模型,考察养血定颤方对模型大鼠平均转速、TH阳性细胞数和自由基损伤的影响。结果：养血定颤方能显著降低平均转速，增加黑质TH阳性细胞，降低MDA水平,提高SOD、GSH水平。结论：养血定颤方能改善帕金森病大鼠旋转行为，保护受损神经元，其机制与减少自由基损伤有关。【关键词】帕金森病行为学多巴胺能神经元自由基损伤养血定颤方帕金森病是一种常见的中枢神

2、经系统变性性疾病，其病理特征是中脑黑质致密部多巴胺能神经元变性缺失。多巴替代疗法虽能改善临床症状，但长期应用会出现“开—关”现象、运动及精神障碍等副作用,且仍无法延缓多巴胺能神经元进行性缺失［1］，因此寻求新的有效治疗手段具有重要意义。养血定颤方系导师张伯礼教授所创新方.freela公司)，美多芭(上海罗氏制药有限公司)，养血定颤方(自制)，MDA、SOD、GSH试剂盒(南京建成生物工程研究所)。仪器：江湾II型立体定位仪(第二军医大学)，微量进样器(安亭微量进样器厂)，病理图文分析系统(千屏影像工程公司)。1

3、.2方法模型药物配制:以0.01%VC溶液配制3μg/μL6羟基多巴胺，避光冷藏；模型制备DA、GSH含量和SOD活性。统计学处理：所有描述性参数以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析。用SPSS13.0软件包进行分析，P0.05为差异有显著性。2实验结果2.1各组大鼠平均转速比较见表1。表1各组大鼠平均转速比较（略）注：与模型组比较##P0.012.2TH免疫组化染色镜下可见棕色阳性物位于胞浆及突起，正常组细胞饱满，突起完整；模型组突起变短，胞体变圆；养血定颤方组有明显改善，见图14。各组大鼠TH阳性细

4、胞数目比较，见表2。图1正常组TH免疫组化（略）图2模型组TH免疫组化（略）图3美多芭组TH免疫组化（略）图4养血定颤方组TH免疫组化（略）表2各组大鼠TH阳性细胞数比较（略）注：与正常组比较##P0.01，与模型组比较△△P0.012.3各组大鼠黑质MDA、SOD、GSH比较见表3。表3各组大鼠黑质MDA、SOD、GSH比较（略）注:与正常组比较##P0.01,与模型组比较△△P0.013讨论帕金森病(Parkinsonsdisease，PD)是老年人常见的神经系统退行性疾病，60岁以上约1%患本病，主要表

5、现为静止性震颤、僵直、少动、姿势障碍等症状。帕金森病的内源性氧自由基中毒假说是由于氧自由基清除系统的缺陷，使黑质、纹状体中氧自由基堆积，过量自由基可以引起生物膜上的不饱和脂肪酸形成过氧化脂质，导致膜流动性降低、通透性增高、线粒体肿胀、溶酶体释放生物酶、细胞器及酶的结构和功能破坏，脂质过氧化物活性增加，生成大量丙二醛，同时引起超氧化物歧化酶活力下降，进一步加重脑组织损伤，以致黑质多巴胺神经元受损而进行性退变［3］。多巴胺替代疗法是首选疗法，但多数患者随着治疗时间的延长，药物有效时间会逐渐缩短，终至完全失效［4］。

6、因此寻找新的安全有效的治疗手段具有重要意义。养血定颤方系导师结合多年临床经验和实验研究成果精心锤炼而成，方中地黄生用，甘寒质润，为补肾要药，白芍养血柔肝、缓急止痛，地、芍合用，酸甘化阴，壮水涵木为君；川芎辛散温通，血中气药，助白芍养血，鳖甲咸寒，血肉有情之品，助生地黄滋阴，共为臣药，全蝎、蝉蜕、僵蚕诸虫药入络搜剔、息风止痉，桑叶、刺蒺藜、珍珠母平肝潜阳，俱为佐使药，诸药合用，滋阴养血以固其本，定痉止颤以蠲其标，并酌加虫类药息风通络，治疗帕金森病有一定疗效，尤其在改善震颤症状、提高患者生活质量等方面疗效显著［5

7、6］。本研究采用单点注射法制备帕金森病模型，从模型大鼠平均转速、TH阳性细胞数和自由基损伤等方面考察养血定颤方治疗帕金森病的作用及机制。结果表明养血定颤方能显著降低平均转速，增加黑质TH阳性细胞，降低MDA水平，提高SOD、GSH水平。上述结果提示养血定颤方能改善帕金森病大鼠旋转行为，保护受损神经元，其机制与减少自由基损伤有关。【