nmda和ampa型谷氨酸受体亚基在成年大鼠前脑室管膜及室管膜下区的分布论文

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1、NMDA和AMPA型谷氨酸受体亚基在成年大鼠前脑室管膜及室管膜下区的分布论文魏丽春,石梅,曹荣,陈良为【关键词】谷氨酸受体;NMDA受体;AMPA受体;室管膜;免疫组织化学LocalizationofNMDAandAMPAtypeglutamatereceptorsinforebrainventricularmembraneandsubventricularzoneofadultrats【Abstract】AIM:ToinvestigatethedistributionpatternsofNMDAtypeandAMPAtypeglu

2、tamatereceptorsubunitsintheforebrainventricularmembraneandsubventricularzoneofadultrats.METHODS:ImmunohistochemicalstainingmunoreactivitiesforNMDAR1(NR1),NR2C,AMPAreceptorsubunit1(GluR1),GluR2/3,andGluR4embraneandsubventricularzone.TheimmunoreactiveproductsforNMDAorAMP

3、Areceptorsubunitsogeneouslylocalizedinthecytoplasmaandcellmembrane.SemiquantitativeanalysisindicatedthatNR1andGluR4immunoreactivecellsoreanddistributedmoredenselythanNR2C,GluR1orGluR2/3immunopositiveonesinventricularmembraneandsubventricularzone.CONCLUSION:Thelocalizat

4、ionofNMDAandAMPAreceptorsubunitsintheventricularmembraneandsubventricularzonesuggeststhatNMDAandAMPAreceptorsmaybeinvolvedinfunctionalmodulationofneurogenesisinaboveregions.【Keyatereceptors;NMDAreceptor;AMPAreceptor;ventricularmembrane;immunohistochemistry【摘要】目的:观察前脑室管

5、膜及室管膜下区N甲基D天门冬氨酸(NMDA)和使君子酸(AMPA)型谷氨酸受体的分布.方法:应用成年SD大鼠前脑切片免疫组织化学方法,显示NMDA和AMPA受体六种亚基的细胞定位.结果:在室管膜及室管膜下区有NMDA受体亚基NR1,NR2C及AMPA受体亚基GluR1,GluR2/3,GluR4免疫反应阳性产物的分布.freelethylDaspartate,NMDA)、使君子酸(alphaamino3hydroxy5methyl4isoxazolepropionicacid,AMPA)和海人藻酸(kainicacid,KA)受体[

6、1-2].以往对NMDA和AMPA受体在脑内神经元上分布和功能已有许多报道[6-9],但缺乏对室管膜及室管膜下区分布和功能的研究.资料表明室管膜及室管膜下区是成年动物神经发生活跃的主要区域之一.为此,我们应用免疫组织化学方法[10],观察NMDA和AMPA受体在大鼠室管膜及室管膜下区的分布,旨在探讨NMDA或AMPA受体参与该区神经发生等功能活动的意义.1材料和方法1.1材料正常成年雄性SD大鼠6只,由第四军医大学实验动物中心提供.第一抗体包括小鼠抗NR1抗体(1∶1000),兔抗NR2C抗体(1∶1000),兔抗GluR1,Glu

7、R2/3,GluR4抗体(1∶300)均为Chemicon公司产品;biotin标记的羊抗小鼠IgG或羊抗兔IgG(1∶200),Vector公司产品;ABC复合物(1∶200),Vector公司产品.1.2方法1.2.1动物固定与切片动物在戊巴比妥钠(40mg/kg,ip)麻醉下,开胸、经左心室至主动脉插管,用生理盐水约100mL快速冲去血液,随即灌注含40g/L多聚甲醛0.1mol/L的磷酸缓冲液(pH7.4),灌流30min.注毕立即取出大脑,4℃下后固定4h.然后换入300g/L蔗糖溶液内,4℃下过夜.冰冻连续冠状切片,片厚

8、30μm.切片按顺序分为数套,分别作NMDA受体亚基NR1,NR2C,AMPA受体亚基GluR1,GluR2/3和GluR4免疫组织化学染色和对照染色.1.2.2免疫组织化学染色参照文献[10]的方法进行,切片于10mmol/LPBS

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