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时间:2018-11-17
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1、氯氨酮减轻高血糖大鼠脑缺血所致的神经元凋亡论文张建忠,景丽,郭风英,马轶,王一理【关键词】高血糖症;脑缺血;氯胺酮;细胞外信号调节MAP激酶类;细胞凋亡;免疫组织化学;免疫印迹法Roleofketamineindecreasingneuronalapoptosiscausedbybrainischemiainratsia【Abstract】AIM:Toinvestigatethemechanismbyinereducestheaggravationofhyperglycemiainducedcerebralischemiclesion.METHODS:Ratsoglycem
2、ia,hyperglycemia,orhyperglycemiapretreatedineinjectioninofglobalbrainischemia,andthenreperfusedfor0.5,1,and3h,respectively.Phosphorylationofextracellularsignalregulatedkinase(ERK)1/2munohistochemistryandeanediateddUTPnickendlabeling(TUNEL).RESULTS:ThephosphorylationofERK1/2intheregionsofci
3、ngulumcortex,hippocampusCA1andCA3,icratsoglycemiareperfusedfor0.5h.paredtothenormoglycemicgroup,thephosphorylationofERK1/2intheregionsofcingulumcortexandhippocampusCA3icgroupreperfusedfor0.5h,entationofphosphorylationineadministrationinhyperglycemicrats.TheextentofERK1/2phosphorylationicbr
4、ainlesions,.freeliamayincreasetheischemicinsultviathemodulationofERK1/2signaltransductionpathineimprovestheaggravationofhyperglycemiainducedcerebralischemiclesion.ThisisprobablymediatedbyinhibitionofNMDAmediatedcalciuminflux,andhyperglycemiainducedphosphorylationofERK1/2.【Keyia;brainischem
5、ia;ketamine;extracellularsignalregulatedMAPkinases;apoptosis;immunohistochemistry;immunoblotting【摘要】目的:探讨氯氨酮减轻高血糖加重脑缺血损伤的机制.方法:在正常血糖、高血糖以及氯氨酮干预条件下,制作大鼠全脑缺血15min,再灌注0.5,1和3h模型.通过免疫组化和免疫印迹技术对比研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化.freelitogenactivatedproteinkinases,MAPK)信号通路,加重缺血导致的脑组织损伤[1-2].脑缺血及再灌注后神经
6、元的死亡与多种机制有关,包括兴奋性氨基酸谷氨酸的释放,钙离子超载及自由基产生等[3-4].由于谷氨酸刺激引起的N甲基D天冬氨酸(NmethylDaspartate,NMDA)受体功能上调能够导致钙离子大量内流,使MAPK激活,引起缺血和再灌注损伤[5].目前针对损伤机制开展的神经保护也在不断探索[6].推测氯氨酮作为NMDA受体阻断剂能够阻断其功能的上调,减少钙离子内流,通过抑制MAPK信号通路的激活而减轻脑组织损伤[7].为进一步证明此推测,我们通过免疫组化和免疫印迹等方法,采用大鼠全脑缺血15min和再灌注0.5,1和3h模型,对比观察氯氨酮对高血糖加重缺血性脑损伤的影
7、响和细胞外信号调节激酶1/2(extracellularsignalregulatedkinase1/2,ERK1/2)磷酸化的关系.1材料和方法1.1材料雄性SD大鼠65只,体质量300~350g,由宁夏医学院实验动物中心提供;抗磷酸化ERK1/2mAb,氯氨酮,连接有辣根过氧化物酶的抗鼠第二抗体,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TdTmediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)试剂盒(美国Sigma);BCIP(5bromo4chloro3indolylphospha
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