基因工程论文参考范文：人溶菌酶-乳铁蛋白基因表达载体之构设与转基因牛克隆胚之体外发育

《基因工程论文参考范文：人溶菌酶-乳铁蛋白基因表达载体之构设与转基因牛克隆胚之体外发育》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、基因工程论文参考范文：人溶菌酶/乳铁蛋白基因表达载体之构设与转基因牛克隆胚之体外发育第一章抗菌蛋白的研究进展人乳中除了含有抗体外，代写论文还含有多种抗菌蛋白保护新生胎儿抵抗感染，提高免疫力。其中人溶菌酶和人乳铁蛋白是人乳中重要的抗菌蛋白(AnemaanddeKruif2011;Palumboetal.2010)。溶菌酶(Lysozyme，LYZ)，别名粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶，是天然的非特异性免疫蛋白，可通过裂解微生物细胞壁从而将其杀死。溶菌酶存在多种动物植物的组织和体液中，具有溶菌作用，且对人和动物(因为没有细胞壁结构)没有毒性。其中多许多革兰氏阳性菌

2、有直接的溶菌作用，对一些革兰氏阴性菌和真菌也有一定的作用(Kroletal.2010)。1.1人溶菌酶1.1.1溶菌酶的种类和特点溶菌酶可分为鸡卵清溶菌酶（c型）、鹅卵清溶菌酶（g型）和噬菌体溶酶（p型）三种类型(Gilletal.2011)。其中人溶菌酶(hLYZ)为c型HYZ，有130个氨基酸构成的多肽，分子量大小是14.7kDa(Frareetal.2009)。人溶菌酶在人乳中的含量很高，是牛乳中的含量的3000倍。人溶菌酶在人体上分布很广，特别是各种人乳和体液里含量很高。其中淋巴液、泪液、脑脊液、唾液、、汗液、尿液、鼻涕、血清和胸水里都含有人溶菌酶

3、(Mossutoetal.2010)。1.1.2溶菌酶的应用1.1.2.1溶菌酶在医学上的应用A抗菌消炎LYZ对革兰氏阳性菌的抑菌效果比较好，能破坏革兰氏阳性细菌的细胞壁，在体内分泌型免疫球蛋白A和补体的参与下，还能溶解大肠杆菌等G-菌(Panuszkoetal.2009)。LYZ还能与各种诱发炎症的物质结合，减少细菌内毒素的释放起到抗菌消炎和修复组织的作用(Virniketal.2008)。国内的研究者(孙怀昌等，2005；杨为荣等，2001)用溶菌酶基因药物对牛乳房炎及产后子宫内膜炎治疗效果很好。B抗病毒溶菌酶可在中性体液环境中与侵入机体内的病毒结合形

4、成复合盐而使其失活。溶菌酶还可以抑制腺病毒的生长、可用于流感、鸡水痘、肝炎、腮腺炎及带状疱疹等病毒性疾患的治疗。C增强免疫力溶菌酶在机体非特异性免疫机能和防御过程中，保持着机体的生理平衡，参与多种免疫反应(Isvoranetal.2001;Pepysetal.1993)。溶菌酶能结合细菌内脂多糖，从而达到增强机体抵抗力的作用。它能结合细菌内的脂多糖，从而达到增强机体抵抗力的作用。溶菌酶还能改善和增强巨噬细胞与白细胞的消化功能，改善局部组织循环不畅，分解脓液等坏死组织，激活血小板，因而可以更好地发挥抗菌消炎与止痛等作用。(Ibrahimetal.2001;

5、Krustevaetal.1997)。1.1.2重组人溶菌酶研究进展目前，人们已经将在原核和真核生物中转入了人溶菌酶基因，并在这些细胞中进行了表达或化学合成，最高水平达到40mg/L，低于人乳中溶菌酶含量(50～250mg/L)，与工业化生产相比仍存在一定的距离(Liuetal.2012)。于政权等（于政权等，2003）制备了溶菌酶转基因小鼠，其中6只是转外源基因的阳性小鼠，通过PCR鉴定，基因组中稳定整合外源基因，又经.T.试验转阴，在奶牛乳腺中能表达活性人溶菌酶，并且表达量可达1.96μg/ml。朱秋菊等（朱秋菊等，2006）将hLYZcDNA与

6、鸡输卵管特异表达载体pOV1和pOV2连接，将获得的重组表达载体pOV1LYZ和pOV2LYZ按一定比例与聚乙烯亚胺混合，通过翅静脉注射产蛋鸡，蛋清中的最高表达到750μg/mL，有效表达可以维持7d左右，载体注射对鸡的产蛋量等生理指标没有明显影响。第二章哺乳动物核移植技术进展2.1哺乳动物核移植技术研究概况动物核移植技术(Nucleartransfer，NT)是将体细胞、胚胎卵裂球细胞或干细胞等动物细胞移植到去核的卵母细胞、去核的受精卵或去核的2-细胞胚胎中，构建成新胚胎，使重构胚发育成为与供核的细胞基因型完全相同的后代的技术，又称为动物克隆技术。

7、按供核体和受体的关系，哺乳动物核移植可分种内核移植（Nucleartransferinhomologousspecies）和种间核移植（Nucleartransferofcross-species）；跟据供体细胞的不同，可以分为干细胞核移植（Nucleartransferofstemcell）、胚胎细胞核移植（Nucleartransferofembryocell）、和终末分化的体细胞核移植（Nucleartransferofsomaticcell）。在终末分化的体细胞核移植成功产下后代后，研究者又将克隆后代的体细胞作为供核细胞，进行再次克隆成功获得后代，

8、该方法被称为连续核移植（serialnuleartransfer）