麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及血

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1、麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及血【摘要】观察麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及血脑屏障（bloodbrainbarrier，BBB)通透性的影响。【方法】将SD大鼠30只随机分为6组：假手术组、模型组、麝香组（剂量为1mg·kg-1·d-1)、冰片组（剂量为3mg·kg-1·d-1)、麝香配伍冰片组、尼莫地平组（剂量为12mg·kg-1·d-1)；采用颈内动脉线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，干湿质量法观察脑含水量的变化，通过收集透出脑血管外的伊文思蓝（Evansblue，EB)来示踪BBB的变化。【结果】脑缺血2h再灌注2

2、4h，模型组较假手术组脑含水量及脑皮质EB含量显著性增加（Ｐ＜０.０１），血脑屏障遭到破坏；麝香配伍冰片组脑含水量较模型组显著性降低（Ｐ＜０.０５），而且麝香配伍冰片组及冰片组脑皮质EB含量较模型组显著性降低（Ｐ＜０.０１）。【结论】麝香配伍冰片可有效降低脑缺血再灌注后脑含水量及血脑屏障的通透性，对血脑屏障结构具有一定的保护作用。【关键词】脑缺血中药疗法药理学冰片药理学中药配伍血脑屏障疾病模型动物大鼠缺血性脑水肿是脑血管病中最常见的死亡原因，是脑梗死必然且重要的病理过程。缺血性脑血管病导致的脑水肿主要由于脑缺血再灌流期间血脑屏障（ＢＢＢ）破坏，这是缺血性脑损

3、伤的重要病理基础。麝香、冰片是中医治疗脑血管病常用的药物，具有开窍醒神的作用。我们的前期研究发现，麝香配伍冰片能显著缩小局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积并可明显改善神经功能损害，对全脑缺血再灌注损伤大鼠亦有脑保护作用［1-4］。本研究采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，通过观察脑含水量及透出血管外伊文思蓝（ＥＢ）含量的变化来探讨麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠ＢＢＢ的影响，为临床防治脑血管病提供实验依据。现报道如下。1材料与方法1.1动物SPF级ＳＤ大鼠３０只，雌雄兼用，体质量260～300g，广东省医学实验动物中心提供，合格证号：SCYY（粤）20030

4、001。1.2药物人工麝香（批号：20050322）、冰片（批号：２０００３２３）由广东致信中药饮片有限公司提供，广东省中药质量监测站检验合格。分别以体积分数为１％吐温配成麝香、冰片悬浊液（每毫升含人工麝香0.1mg、冰片0.３mg）；尼莫地平由德国拜耳公司生产（批号：１０３７２８），用体积分数为１％吐温配成悬浊液（每毫升含尼莫地平１.２mg）。　　1.3仪器及试剂伊文思蓝由Sigma公司生产；二甲基甲酰胺由Sigma公司生产；FX42型电热恒温干燥箱由Shellab公司生产；BT224S电子天平由Sartorius公司生产；Ｕ２００１型紫外分光光度计由H

5、itachi公司生产。1.4动物分组与给药大鼠随机分为６组，即假手术组、模型组、麝香组（剂量为1mg·kg-1·d-1）、冰片组（剂量为3mg·kg-1·d-1）、麝香配伍冰片组、尼莫地平组（剂量为12mg·kg-1·d-1），每组5只。各组大鼠用药量按体表面积公式计算，药物灌胃量为10mL·kg-1·d-1，假手术组与模型组给予体积分数１％吐温溶液1０mL·kg-1·d-1灌胃。各组在造模前12h给药1次，再于缺血前30min给药1次，缺血后12h与24h各给药1次（共给药4次）。1.5模型制备参照Longa等［5］的线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。术前禁

6、食１２h，自由饮水；实验前腹腔注射100g/L水合氯醛（０.３５g/kg)麻醉，取大鼠腹侧颈部正中手术切口，分离右侧颈总动脉、颈外动脉，颈内动脉和翼腭动脉；结扎翼腭动脉，然后在距颈总动脉分叉1cm处结扎颈外动脉，并于颈外动脉远心端用电凝器灼断；动脉夹夹闭左颈总动脉，在颈外动脉距结扎处近心端约０.５cm处剪一切口，将尼龙线栓经右侧颈外动脉主干切口缓慢向颈内动脉入颅方向推进，以颈总动脉分叉处为标记，推进１８～２０mm感到轻微阻力时，即阻断大脑中动脉；阻断２h后，拨出尼龙线，扎紧动脉残端，缝合皮下组织和皮肤，完成缺血再灌注损伤模型。假手术组除不插线外，全过程同其他

7、各组。1.6脑含水量测定采用干湿质量法测定缺血侧脑含水量。脑缺血再灌注２４h后处死大鼠，快速断头取脑，滤纸擦去表面水分，取缺血侧半边大脑，置天平内精密称取湿质量，然后置110℃电烤箱２４h，再迅速测干质量。计算脑含水量：p含水，脑/%=（m湿脑-m干脑）/m湿脑×100%。1.7伊文思蓝标准曲线制备将二甲基酰胺配制的伊文思蓝母液按倍比稀释法配制成不同浓度（５0～１０００ng/mL），在分光光度计上测定其吸光度，测定波长为620nm，以浓度（ρ）为横坐标，以吸光度（Ｄ）为纵坐标，求得回归方程Y=0.0423X+0.0447，r=0.999。1.8伊文思蓝含量测

8、定ＢＢＢ的通透性是按照Uyama等［6］的方法加以改