榄香烯联合三苯氧胺对乳腺癌mcf

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1、榄香烯联合三苯氧胺对乳腺癌MCF作者：周小娟，郑棋，赵小丽，马海琳【关键词】乳腺癌；三苯氧胺；榄香烯；协同作用　　摘要：目的观察榄香烯和三苯氧胺对乳腺癌细胞的抑制效应，尤其是两者联合应用有无协同增效作用。方法将MCF7细胞培养于RPMI1640培养基中，置入37℃，100%湿度，5%(体积分数)的CO2培养箱内。接种细胞并加入实验药物，用CCK8法检测三苯氧胺联合榄香烯对细胞的增殖抑制效应，用酶标仪在450nm测量每孔吸光度值，计算每组细胞抑制率。结果无毒剂量的榄香烯与治疗剂量的三苯氧胺联合应用，吸光度均值较单

2、用三苯氧胺明显下降，并且相应的细胞抑制效应较单用组明显上升。结论无毒剂量的榄香烯能够使三苯氧胺对乳腺癌细胞的抑制效应显著增强，提示榄香烯与三苯氧胺联合应用具有协同作用。　　关键词：乳腺癌；三苯氧胺；榄香烯；协同作用　　Theinhibitoryeffectofelemenebinedoxifen　onthebreastcancerMCF7cellline　　ABSTRACT:ObjectiveToexploreifelemenecansynergizetamoxifenthroughusingnoncytoto

3、xicdoseofelemeneandtamoxifeninbinationonMCF7celllineofbreastcancer.MethodsFirst,MCF7celllineeneonMCF7celllineeneandcurativedoseoftamoxifenintothetentalgroups,theabsorptivityinthetoxifenalone;accordingly,theinhibitionrateintixinggroupsincreasedobviouslyparede

4、neofinnocuousdosecanremarkablyenhancetheinhibitoryeffectoftamoxifen,enemaysynergizetheeffectoftamoxifenonbreastcancer.　　KEY)作为内分泌治疗一线药物已经广泛应用于乳腺癌高危妇女的预防性治疗[3]以及乳腺癌雌激素受体阳性(ER+)患者的辅助内分泌治疗[4]。然而同类抗雌激素药物对于TAM治疗失败者却效果甚微；第3代芳香化酶抑制剂作为绝经后TAM治疗失败后的二线药物，虽具有高效、选择性、毒副作用

5、少等特点，但仅对绝经后患者有效，且价格较TAM高。TAM作为乳腺癌患者内分泌治疗的首选药物，长期应用有可能增加子宫内膜癌的危险性[56]。还会产生继发耐药或肿瘤的复发和转移，均影响其临床疗效。本研究采用中药莪术提取物榄香烯(elemene,ELE)和TAM联合应用于乳腺癌MCF7细胞系，探索ELE对TAM有无协同增效作用，从而为ELE参与乳腺癌的辅助治疗，提高内分泌药物的疗效开辟新的思路。　　1材料与方法　　1.1主要试剂乳腺癌MCF7细胞株，由西安交通大学医学院病理学系提供；RPMI1640培养基和胰蛋白酶，

6、购自美国Gibco公司；胎牛血清(FBS)购自(中国)鼎国公司；胰岛素、EDTA和三苯氧胺(TAM)系美国Sigma公司产品；CCK8试剂由同仁化学研究所中国(上海)代办处提供；榄香烯(ELE)4℃冰箱保存，系中国大连金港制药有限公司产品。　　1.2常用工作液的配制①磷酸缓冲液(PBS)的配制：称取KCl0.2g，KH2PO40.2g，NaCl8.0g，Na2HPO4・12H2O2.89g，混合溶解于1000mL的双蒸水中，并调定pH7.2-7.4。②消化液的配制：胰蛋白酶粉末0.25g，EDTA

7、0.04g，加入PBS液100mL并用磁力搅拌器使其完全溶解，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装，于-20℃保存。　　1.3细胞培养将MCF7细胞培养于含100mL/L胎牛血清的RPMI1640培养基中，37℃，100%湿度，5%(体积分数)的CO2培养箱内。　　1.4CCK8法检测三苯氧胺联合榄香烯对细胞增殖的抑制效应将细胞接种于96孔培养板，培养24h。以8孔为一组分别加入4个不同浓度的TAM(T2-T5，即1.50×10-5、1.50×10-6、1.50×10-7、1.50×10-8mol/L)和4个不同

8、浓度的ELE(E1-E4，即6.15×10-1、6.15×10-2、6.15×10-3、6.15×10-4g/L)溶液，最后加入2种不同浓度的混合液，在培养箱内培养48h。然后每孔加入10μLCCK8液，培养4h，用酶标仪在450nm测量每孔吸光度值，计算每组细胞抑制率。　　1.5数据分析用SPSS11.5统计分析软件进行方差分析，采用LSD及Dunt法两两比较进行描述性统计，方差齐性