反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量

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时间:2018-11-09

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1、反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量作者:胡文彦,段金廒,钱大玮,朱玲英,钱士辉【关键词】百合;,,酚酸甘油苷;,,Regaloside,C;,,Regaloside,A;,,反相高效液相色谱法  摘要:目的测定百合中酚酸甘油苷RegalosideC及RegalosideA的含量。方法色谱柱为AlltimaC18(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-水(27∶73)作为流动相,流速1.0ml・min1,检测波长325nm。结果百合鲜品中RegalosideC和RegalosideA平均回收率分别为99.8%和97.4%,其RSD分别为0.6

2、7%和1.36%;干品中RegalosideC和RegalosideA平均回收率分别为100.6%和102.5%,其RSD分别为1.37%和1.16%。结论该方法快速,重现性和稳定性好,可用于百合中该物质的含量测定。  关键词:百合;酚酸甘油苷;RegalosideC;RegalosideA;反相高效液相色谱法  DeterminationofTinetedonaAlltimaC18column(4.6mm×250mm,5μm).MeOHH2O(27∶73)obilephase.Theflol・min1.Thedetection.ResultsInfresh

3、lily,theaveragerecoveriesofregalosideCandregalosideAethodisaccurate,rapidandreproducible,canbeusedtodeterminethephenolicglycosidesinlily.  KeylancifoliumThunb.、百合LiliumbroBaker或细叶百合LiliumpumilumDC.的干燥肉质鳞叶[1],卷丹主产于江苏宜兴。近年来国内外在百合化学成分、药理作用、临床应用方面进行了大量的研究[2,3],但对于其成分含量测定以及质量控制的报道却很少[4~6],有关酚酸

4、甘油苷的含量测定未见报道。本文建立了卷丹中酚酸甘油苷RegalosideC和RegalosideA的高效液相色谱含量测定方法,以期为控制百合的质量提供科学依据。  1器材  1.1仪器polancifoliumThunb.。  2方法与结果  2.1色谱条件色谱柱AlltimaC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为水甲醇(73∶27)。流速1.0ml・min-1,检测波长325nm,柱温30℃,进样量10μl。在此条件下:样品中RegalosideC和RegalosideA与其他成分达到基线分离,理论塔板数RegalosideC为5982.078

5、,RegalosideA为8606.925。分离效果见图1~2。  1.RegalosideC2.RegalosideA  图1对照品(a)和百合样品(b)的HPLC色谱图(略)  1.标准品2.样品  图2RegalosideC和RegalosideA光谱图(略)  根据DAD检测器的的特点,我们比较了对照品和样品中RegalosideC和RegalosideA的光谱曲线,从图中可以看出,两条光谱图曲线完全吻合,说明在该色谱条件下分离效果好,无杂质干扰。  2.2线性关系考察取对照品RegalosideC2.338mg和RegalosideA6.174mg,精密称定,分

6、别置25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得RegalosideC0.0935g・l1,RegalosideA0.2469g・L1的储备溶液。分别精密吸取两种对照品储备溶液1,5,10,15,20,25μl,分别进样,以进样量(X)为横坐标,对照品RegalosideC和RegalosideA峰面积积分值(Y)为纵坐标进行回归,RegalosideC在0.10~2.62μg范围内线性良好,Y=2.12×106X1.95×104(r=0.999961);RegalosideA在0.31~7.86μg范围内线性良好,Y=1.65×106X

7、-5.59×104(r=0.999998)。  2.3精密度实验 分别吸取0.0935g・L1的RegalosideC和0.2469g・L1的RegalosideA储备溶液,重复进样5次,进样10μl/次,测定RegalosideC和RegalosideA峰面积,RSD分别为0.352%,0.359%。  2.4供试品制备 取粉碎后的百合鲜品(洗净,晾干)约20g,干品约3g(鲜品105℃蒸气加热6min,55℃烘干),精密称定,置于圆底烧瓶中,加40%甲醇于80℃水浴上热回流提取2次,提取时间为1

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