丙戊酸钠对体外培养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用

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1、硕t学位论文丙戊酸钠对体外培养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用姓名：田博申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：i智20090501丙戊酸钠对体外培养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科2006级硕士研宄生：田博导师：王智副教授目的：探讨丙戊酸钠(sodiumvalproate,VPA)对体外培养的人晶状体上皮细胞(humanlensepithelialcells，HLECs)增生和细胞周期的影响。方法：采用不同浓度的VPA(0.5mmol•L-i、1mmol•L-i、2mmol•L.i、4mmol•L.i)作用丁•人晶状体上皮细胞，四甲基

2、偶氮唑蓝法(MTT)检测在不M吋间点(24h、48h、72h)VPA对细胞增生的抑制作用；流式细胞仪测定VPA(1mmol•L-i、2mmol-L.O作用于HLECs48h后细胞周期分布情况;Western-blot测定在VPA(1mmol•L-i>2mmol•Ld)作用于HLECs48h后，P21(细胞周期依赖性激酶抑制因子)在蛋白质水平表达量的改变。结果：MTT检测显示VPA对体外人晶状体上皮细胞的增生的抑制作用呈时间和剂量依赖性。VPA作用48h后，各药物浓度组(0.5mmol•L-i>1mmol•L-i>2mmol•L.i、4mmol•Lu)细胞生长抑制率分别为11

3、.05%,21.58%,26.67%和38.25%,流式细胞仪检测显示VPA可阻滞HLECs由G0/G1期向S期转换，使G0/G1期细胞增多，S期细胞减少。经2mmol-L-iVPA作用48h,G0/G1期及S期细胞比例分别为85.40土3.90%和7.35.土1.47%,较阴性对照组(53.14士1.71%和35.31士1.14%)差异具有统计学意义(P<0.05)。Westernblot检测发现VPA可促进P21蛋白质水平的表达。VPA处理48h后，各组平均灰度比值分别为0.582土0.082(1mmol-L-i)和0.914士0.113(2mmol•L-i),与阴性对

4、照组(0.303±0.029)比较，差异有统计学意义(P<0.05).结论：VPA可以通过促进P21表达，使人晶状体上皮细胞阻滞于G0/G1期，最终抑制人晶状体上皮细胞增生。【关键词】丙戊酸钠；人晶状体上皮细胞；增生；后囊膜混浊InhibitoryeffectofsodiumvalproateonproliferationofhumanlensepithelialcellsinvitroDepartmentofOphthalmology,UnionHospitalofTongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTec

5、hnology,Wuhan430022,HubeiProvince,China2006MasterCandidate:TianBoTutor:ProfessorWangZhiAbstract[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectsofsodiumvalproate(VPA)ontheproliferationandcellcycleinvitro.MethodsHLECsweretreatedwithVPAindifferentconcentrations(0.5mmolL-i、1mmol.L-i、2mmolL-i、4mmol.L

6、-i)fordifferenthours(24h、48h、72h).CellproliferationwasassessedbyMTTassay.AfterHLECsweretreatedwithVPA(lmmol.L-i、2mmolL-i)for48h,cellcyclewasanalyzedbyflowcytometryandtheexpressionofp21(cyclin-dependentkinaseinhibitor)wasdetectedbyWesternblot.ResultsMTTstainingcolorimetryshowedthattheHLECsp

7、roliferationwasmarkedlyinhibitedandtheeffectswastimeanddosedependent.TheinhibitionrateofculturedLECswas11.05%,21.58%,26.67%and38.25%respectivelyin0.5,1,2and4mmolL-iofVPAgroupafter48hourstreatment(P<0.05).MoreculturedHLECswasintheG0/G1phaseandfewerintheSphasein