骨髓检查标准操作程序

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1、月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_09页码：第-4-页，共4页检验科检验科血液分析SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101SOP_09-2骨髓检查标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。二、适用范围：血液骨髓检验。三、操作人员：检验科授权工作人员。四、操作步骤：血细胞形态学检查主要用于观察骨髓与血液中细胞数量和质量的变化，借以了解其造血功能。对疾病的诊断、疗效的观察、预后等研究都具有重大价值。血细胞化学染色是在观察形态的基础上进一步了解细胞化学成分，对血细胞各种

2、生化成分及代谢产物作定性、定位和定量的观察，临床上亦常用以协助诊断、鉴别诊断血液病和其他疾病。1骨髓象检查：1.1骨髓细胞形态检查步骤：(1)骨髓取材：①骨髓穿刺部位：一般取胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等部位。两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。穿刺部位不同，取材可能有明显差异。以胸骨穿刺最好，棘突次之，髂骨最差。故必要时应多部位取材，以便能全面地了解骨髓情况。②吸骨髓液：一般不超过O.2ml，否则易于稀释。③骨髓取材满意的几项指标：抽吸骨髓时，患者有特殊酸痛感，骨髓液中应含有骨髓小粒。显微镜下观察涂片，可发现骨髓特有细胞。(2)涂片检查：①涂片制备：要求涂片

3、均匀，有头、体、尾三部分，血膜面积约1.5cm×3cm，厚度以透过血膜可看清字迹为限。选择骨髓小粒部分制作涂片，骨髓液量不宜过多。因骨髓的凝固较快，涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝，否则会使血细胞核变形，核染色质致密，胞浆空泡形成，出现草酸盐结晶。②涂片检查：一般体积大的细胞分布于涂片的上下边缘及尾部，计数时应该从体尾交界处开始迂回向尾部移动。(3)染色：选用瑞氏(Wright)和姬姆萨(Giemsa)混合染色。具体方法：髓片两端用蜡笔划线，必要时在血膜边缘较厚处用铅笔写明患者姓名及日期或编号。加染液3～5滴于涂片上，静置1min(天热时间缩短)，

4、然后加5～10滴磷酸盐缓冲液，使两液混匀，约10～15min，用水冲洗髓片，冲洗时平放玻片，缓缓用流水冲洗(勿先倒去染料)，待干镜检。附注；①涂片要新鲜，涂片后立即进行染色，如特殊情况，一般不超过1周。否则，细胞蛋白质变性，使染色偏碱。编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四时间：20180101时间：20180101时间：20180101月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_09页码：第-4-页，共4页检验科检验科血液分析SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101②染色时间长短与气温、细胞增生情况、染液的性能有关

5、，要求将染色中的涂片在显微镜下观察，待颗粒清楚、核浆分明、着色满意后才终止染色，冲洗晾干待检。③染色过深的涂片可用瑞氏-姬姆萨混合染液滴加于涂片上，马上冲洗。如过浅可重染，先加缓冲液，再加染色液，混合后复染到需要的深度。(4)估计骨髓增生程度（骨髓涂片观察）：先在低倍镜下全面观察成熟红细胞与有核细胞的大致比例，以确定增生程度。国内一般分为5级，判断标准如下：增生极度活跃：成熟红细胞与有核细胞之比约为1：1，见于白血病、红白血病。增生明显活跃。：成熟红细胞与有核细胞之比约为10：1，见于白血病、增生性贫血。增生活跃：成熟红细胞与有核细胞之比约为20：1

6、，见于正常骨髓和某些贫血。增生减低：成熟红细胞与有核细胞之比约为50：1，见于造血功能低下时。增生严重减低：成熟红细胞与有核细胞之比约为300：1，见于典型的再生障碍性贫血。(5)粒、红比值计算：将粒细胞系统从原始到成熟阶段的总和与红细胞系统从原始到晚幼红细胞总和相比，称为粒、红比值。参考值：成人为2～4：1。粒红比值增高见于化脓性感染、类白血病反应、粒细胞性白血病、红细胞生成受抑制等。降低见于粒细胞生成受抑制，如粒细胞缺乏症或红细胞系统增生，如急性溶血或失血、缺铁性贫血等。1.2骨髓有核细胞计数（试管法）：用血红蛋白吸管吸取骨髓液20ml，放入装有

7、1ml白细胞稀释液的试管中，充分振荡2min，摇匀。按白细胞计数方法，数5个大方格细胞，其结果乘以102，即得1ml有核细胞数。参考值：10～180×109／L。增高见于骨髓增生性疾病（如白血病、溶血性贫血、脾功能亢进）。降低见于骨髓增生不良性疾病（如再生障碍性贫血等）。附注：骨髓穿刺时，勿混入血液，取骨髓液时，先计数后涂片，防止凝固。1.3骨髓巨核细胞计数：取骨髓液作涂片，低倍镜检查找巨核细胞，寻找1.5cm×3cm为一单位面积，计数其巨核细胞。取材必须良好，涂片不宜过厚，以透过涂膜看到字迹为度。参考值：巨核细胞参考值：7～35个。分类：原巨核细胞

8、0；幼巨核细胞O～O.05(O～5%)；颗粒型巨核细胞0.10～0.27(10%～27%)；产板型巨型巨核细