3脑脊液常规检查的标准操作程序

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1、岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号：SOP-JZ-003.00第1版/第0次修改文件名称：脑脊液常规检查标准操作规程编写人：李林审核人：彭进批准人：刘培香第5页，共6页实施日期：2011-9-1一、目的规范脑脊液常规检查。二、适用范围适用于脑脊液的常规检测，包括：一般性状的检查、潘氏试验、细胞总数计数、白细胞计数与分类、革兰氏染色、抗酸染色、墨汁染色。三、支持性文件《全国临床检验操作规程》(第三版)、《临床检验基础》（第三版）四、标本处理1、标本收集后

2、应立即送验，一般不能超过1h。收到标本后应立即检查，久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破坏或溶解。2、细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。五、一般性状检查主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌，并应及时接种培养基。1、红色：如标本为血性，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应注意：(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r／min)，如上层液体呈黄色，隐血试验阳

3、性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。(2)红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺外伤引起出血时也可见到。因脑脊液渗透压较血浆高所致。2、黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。3、米汤样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。4、绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。岳阳市一人民医院TheFirstPeople

4、’sHospitalofYueyang文件编号：SOP-JZ-003.00第1版/第0次修改文件名称：脑脊液常规检查标准操作规程编写人：李林审核人：彭进批准人：刘培香第5页，共6页实施日期：2011-9-15、褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。五、潘氏(Pandy)球蛋白定性试验1、原理脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。2、试剂5％苯酚溶液：取纯苯酚25m1，加蒸馏水至500m1，用力振摇，置37℃温箱内1—2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。3、操作取试

5、剂2—3m1，置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液l一2滴，衬以黑背景，立即观察结果。4、结果判断阴性：清晰透明，不显雾状。极弱阳性(土)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。弱阳性(十)：灰白色云雾状。阳性(2十)：白色浑浊。强阳性(3十)：白色浓絮状沉淀。最强阳性(4十)：白色凝块。5、临床意义正常时多为阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑脊液中，亦可呈阳性反应。六、细胞计数（一

6、）、细胞总数1、器材及试剂(1)细胞计数板；(2)红细胞稀释液(配法同血液红细胞稀释液)。2、操作岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号：SOP-JZ-003.00第1版/第0次修改文件名称：脑脊液常规检查标准操作规程编写人：李林审核人：彭进批准人：刘培香第5页，共6页实施日期：2011-9-1(1)对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内

7、的细胞×10，即得每μl脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。(2)浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释液0．38m1的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每μl脑脊液的细胞总数。(二)、白细胞数1、非血性标本：小试管内放入冰乙酸1—2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3—4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。2、血性标本：将混匀的脑脊液用1％冰乙酸溶液稀释

8、后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。每μl脑脊液内白细胞校正数＝每μl脑脊液内白细胞未校正数每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞-──────────────────────每μl血液内红细胞3、参考值正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞。成人：(0—8)×10ˇ6/L儿童：(0一15)×10ˇ6/L多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为7：3，偶见内皮细胞。4、附注(1)计数应及时