脑脊液常规检查标准操作手册

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1、脑脊液常规检查标准操作手册1.目的：建立脑脊液常规检查的标准化操作；2.范围：适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查)；3.标本采集：3.1标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。3.2标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1-2毫升。3.3遇高蛋白标本时可采用EDTAK2抗凝。4.标本储存：立即送检。5.标本运输：室温运输。5.标本拒收标准：污染，久置标本。6.器材试剂：5%

2、苯酚溶液：取纯苯酚25ml,加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。细胞计数板；显微镜。7.物理检查：7.1目测脑脊液颜色与透明度:(1)观察颜色。(2)观察透明度。(3)观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内，静置12-24小时，正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。7.2结果判断与分析：7.2.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变:(1)红色：常由于各种出血引起。脑脊液中出现多量的红细胞，主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。前者在留取

3、三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明。当蛛网膜下腔或脑室出血时，三管呈均匀红色，离心后上清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。(2)黄色：可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色。停止出血后，这种黄色仍可持续3周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤，格林-巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1.5

4、g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时，因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如核黄疸、新生儿溶血病时脑脊液也呈黄染。(3)白色或灰白色：多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。(4)褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。7.2.2透明度：正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300×106/L时可变为混浊；蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。填写报告时用

5、“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。7.2.3凝块或薄膜：正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物，结核性脑膜炎的脑脊液静置12-24小时后，可见表面有纤维的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高。蛛网膜下隙梗阻时，由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，此时脑脊液呈黄色胶冻状。填写报告百可用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。8.蛋白定性试验(潘氏法)：8.1实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白

6、色浑浊或沉淀。8.2试验方法：取潘氏试剂2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果。8.3结果判断：阴性：清晰透明，不显雾状；极弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到；弱阳性（+）：灰白色云雾状；阳性（+）：白色浑浊；强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀；最强阳性（4+）：白色凝块；9.细胞检查：在显微镜下对脑脊液有形成分进行计数和分类检查。9.1细胞总数：9.1.1对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每µl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的

7、细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10，即得每µl脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。也可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再用人工计数，或直接用血细胞分析仪进行计数；9.1.2浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20µl，加入含红细胞稀释液0.38ml的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每µl脑脊液的细胞总数。9.2白细胞数：9.2.1非血性标本：小试管内放入冰乙酸1-2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3-4滴，数分钟后，

8、混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。9.2.2血性标本：将混匀的脑脊液用1%冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。每µl脑脊液内白细胞校正数：每µl脑脊液内红细胞数×每µl脑脊液内白细胞数=每µl脑脊液内白细胞未校正数－每µl血液内红细胞