血细胞直方图课件

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血液常规检验太谷人民医院检验科高文银 三分群血液分析仪的检测项目：1、白细胞计数（WBC）2、淋巴细胞百分率（LYM%）3、单核细胞百分率（MXD%）4、中性粒细胞百分率（NEUT%）5、淋巴细胞计数绝对值（LYM＃）6、单核细胞计数绝对值（MXD＃）7、中性粒细胞计数绝对值（NEUT＃）8、红细胞计数（RBC）9、血红蛋白浓度（HGB）10、红细胞压积（HCT） 11、平均红细胞体积（MCV）12、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）13、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）14、红细胞分布宽度（RDW）15、血小板计数（PLT）16、平均血小板体积（MPV）17、血小板分布宽度（PDW）18、血小板比容（PCT）附加三个直方图：白细胞、红细胞、血小板直线方程图 标本的采集1.早晨抽取空腹静脉血使用含有EDTA-K2抗凝剂的真空采血管（BD公司紫色或泰尔茂公司2ml紫色封皮），抽血后轻轻颠倒数次混匀，避免凝固，及时送检。30-60分钟取结果。2.不要求空腹，在患者左手无名指内侧，取血约100-150微升血液，混匀检测，20分钟取结果。 标本采集注意事项1.采指血避开水肿、冻疮、发炎部位。2.采血时不能用力挤压，避免细胞破碎，造成检测结果偏低。 测定方法仪器法:显微镜计数法: 血细胞计数原理（电阻法）根据血细胞相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积的测定。将测定的某些数值经仪器设定的固定公式求出其余数据。 白细胞手工计数法用白细胞稀释液将血液稀释20倍,并将红细胞破坏后，滴入计数池中，静置3分钟,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。 WBC生物参考区间成人（3.5～9.5）×109/L新生儿（15.0～20.0）×109/L6个月至2岁（11.0～12.0）×109/L 白细胞检测的临床意义增多：1生理性增多：初生儿、运动、疼痛、情绪变化、应激、妊娠、分娩。2病理性增多：急性感染、严重组织损伤、大量细胞破坏、急性大出血、急性中毒、肿瘤。 白细胞减少的临床意义病理性减少：某些感染、某些白血病、慢性理化损伤、自身免疫性疾病、脾功能亢进。 RBC生物参考区间新生儿6.0-7.0×1012/L成年男性：4.30-5.80×1012/L成年女性：3.80-5.10×1012/L 红细胞检测的临床意义增多:相对性增多：见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤等绝对性增多：可分继发与原发1继发：红细胞生成素代偿性增加：因血氧饱和度减低，组织缺氧所引起生理性红细胞生成素代偿性增加，见于胎儿和新生儿，高原地区居民。病理性见于慢性心、肺疾患。红细胞生成素非代偿性增加：与某些肿瘤或肾脏疾患有关。2原发：真性红细胞增多症，是一种多能造血干细胞受累所致的骨髓增殖性疾病，本病属慢性和良性增生。但具有潜在恶性趋向。 RBC减少生理性减少：见于婴幼儿及妊娠妇女等病理性减少：见于各种贫血如红细胞生成不足，红细胞破坏过多及失血等。 血小板计数手工计数法：用一次性无菌采血针迅速刺破皮肤，深度约2-3mm，以稍加挤液能流出为宜。擦去第一滴血，从穿刺处远端向指尖方向轻轻挤压，用20µ一次性采血管吸取血液20µl，加到含有0.38ml血小板稀释液的采血管中，颠倒混匀，充入计数池，静置10分钟后显微镜计数。 血小板计数参考值（125-350）*109/L 血小板计数的临床意义减少：血小板减少（<125*109/L）见于：1血小板生成障碍：再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等。2血小板破坏增多：原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进。3血小板消耗过多：DIC等。 血小板计数的临床意义增多：血小板增多（>400*109/L）见于1骨髓增生综合征、慢粒、真性红细胞增多症等。2急性感染、急性失血、急性溶血等。3其他：脾切除术后。 嗜酸性粒细胞直接计数用20µl一次性采血管吸取血液20µl，擦净管外余血,加到含有0.38ml嗜酸性粒细胞稀释液中，轻轻颠倒混匀，静置20分钟，充池显微镜计数。 嗜酸性粒细胞参考值：0.02-0.52*109/L 嗜酸性粒细胞直接计数的临床意义主要用于观察传染病、手术后、烧伤患者的预后及测定肾上腺皮质功能等。 网织红细胞计数用100µl一次性采血管采血约100-150µl,加入上述试管中,混匀编号。静置15-20分钟后，取1滴制成薄片。油镜下使用Miller窥盘计数法，计数1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率报告。 网织红细胞计数参考值：成人：0.5-1.5%新生儿：3.0-6.0% 网织红细胞计数的临床意义1判断骨髓红细胞造血情况增加：表示骨髓造血功能旺盛，各型贫血均可增多，溶血性贫血尤为显著，恶性贫血或缺铁性贫血应用VitB12或铁剂治疗后显著增加，表示有疗效。减少：再生障碍性贫血2观察贫血疗效：缺铁贫、巨幼贫患者治疗前，Ret仅轻度增高（也可正常或减少），给铁剂或维生素B12、叶酸、治疗3-5天后，Ret开始上升，7-10天达到高峰，2周左右Ret开始下降，表明治疗有效。3骨髓移植后监测 直线方程图生成原理在上述数据的基础上，仪器对不同体积的细胞通过小孔时产生的电脉冲大小进行分群，将大小2~450fl的血细胞产生电脉冲细分入256个通道，每个通道为1.64fl。同一类细胞产生的电脉冲相同或相近归属为同一区域，从而显示出各类细胞的体积直方图。 血球仪可在一分钟之内对样本同时进行红细胞、白细胞、血小板三种细胞的直方图绘制。3590160300450%白细胞三分类直方图 血球仪可在一分钟之内对样本同时进行红细胞、白细胞、血小板三种细胞的直方图绘制。 一、白细胞直方图血液分析仪器在35~450fl范围内将白细胞分为3群。正常白细胞直方图（图1-1）的左侧又高又陡，跨越35~95fl定为淋巴细胞群（小细胞群），以成熟小淋巴细胞为主；最右侧又低又宽，跨越160~450fl定为中性粒细胞群（大细胞群），以中性粒细胞为主；左右两峰之间较平坦区定为单个核细胞区（中间细胞群），主要以单核细胞为主，也包含嗜酸、嗜碱性粒细胞及白血病细胞等。 3590160300450%正常白细胞三分类直方图（1-1）小细胞群大细胞群中间细胞群 白细胞直方图与临床应用白细胞直方图的变化，可评价血液中白细胞群体的变化，但这种变化的细胞图并无特异性，某一类白细胞的增多或减低均可使直方图产生相似的变化。因此，异常白细胞直方图（如图：1-4~1-16）只能提示白细胞分群之间比例变化或可能出现异常白细胞，故必要时可用显微镜复查血涂片（外周血细胞学分析）。 中性粒细胞比例增高（淋巴细胞相对减低）中性粒细胞比例增高（淋巴细胞相对减低直方图显示淋巴细胞峰明显缩小甚至缺如，中性粒细胞右侧区域异常。常见于各种原因引起的中性粒细胞增多、淋巴细胞减低症等。（图1-4）。 3590160300450%中性粒细胞比例增高（淋巴细胞相对减低）白细胞直方图（1-4）中性粒细胞群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%中性粒细胞比例增高（淋巴细胞相对减低）白细胞直方图（1-4）中性粒细胞群虚线为正常白细胞曲线 中性粒细胞比例减低（淋巴细胞比例增高）中性粒细胞比例减低（淋巴细胞比例增高），直方图显示淋巴细胞峰明显增大，而中性粒细胞峰明显缩小。多见于婴幼儿、再生障碍性贫血、中性粒细胞缺乏症、淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病等。（图1-5）。 3590160300450%中性粒细胞比例减低（淋巴细胞相对增高）白细胞直方图（1-5）中性粒细胞群淋巴细胞群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%中性粒细胞比例减低（淋巴细胞相对增高）白细胞直方图（1-5）中性粒细胞群淋巴细胞群虚线为正常白细胞曲线 嗜酸性粒细胞、单核细胞增高直方图嗜酸性粒细胞或单核细胞增高，直方图在98~132fl区域内的细胞峰明显增高，并通常仪器出现不能判断中间细胞区域值而报警，提示淋巴细胞与单个核细胞之间的区域异常、单个核细胞与中性粒细胞峰之间区域有异常，可能存在异型淋巴细胞、浆细胞、原始细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等。根据患者临床情况必要时行外周血细胞学分析进一步检查。（图1-6和1-7）。 3590160300450%嗜酸性粒细胞增高白细胞直方图（1-6）中性粒细胞群淋巴细胞群嗜酸性粒细胞群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%单核细胞增高白细胞直方图（1-7）中性粒细胞群淋巴细胞群单核细胞群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%中间细胞增高白细胞直方图（1-6/7）中性粒细胞群淋巴细胞群单核细胞群虚线为正常白细胞曲线 急性白血病直方图白血病细胞在某一区域出高大细胞峰，同时仪器报警。白细胞总数明显增高，必须指出，不同类型的白血病可出现相似的直方图，同一标本在不同的仪器分析，其直方图也有所差异。患者出现白血病共性特征时须骨髓细胞学明确诊断。（图1-8和1-9） 3590160300450%急性非淋巴细胞白血病直方图（1-8）原始、幼稚细胞增多（单一主峰）幼稚细胞主峰群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%急性淋巴细胞白血病直方图（1-9）原始、幼稚细胞增多（单一主峰）幼稚细胞主峰群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%急性白血病直方图（1-8/9）原始、幼稚细胞增多（单一主峰）幼稚细胞主峰群虚线为正常白细胞曲线 图1-8和图1-9主体坡峰极为相似，单靠血十八项不能确定急性非淋巴细胞与急性淋巴细胞，必需进行骨髓细胞学分析明确诊断。 慢性白血病直方图治疗前白细胞总数明显增高，在单个核细胞区和中性粒细胞区左侧范围有一高大的细胞峰，图形呈一平台状；（图1-10）冶疗后如疗效佳，白细胞总数减低，直方图可恢复正常；（图1-11）若发生急变，直方图可出现向急性白血病直方图趋势。（图1-12） 3590160300450%慢性白血病冶疗前白细胞直方图（1-10）平台状主峰群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%慢性白血病冶疗后好转白细胞直方图（1-11）冶疗前曲线虚线为正常白细胞曲线治疗后曲线 3590160300450%慢性白血病急变白细胞直方图（1-12）虚线为正常白细胞曲线治疗后曲线好转后急变倾向 异型淋巴细胞增高直方图由于异型淋巴细胞体积比正常淋巴细胞偏大，仪器将其归属于中间细胞群，直方图上表现为小细胞群与中间细胞群融合，呈骆峰形。此曲线并非具有特异性，应与单核细胞增高直方图区别，鉴别方法为外周血细胞学分析。（图１-13） 3590160300450%异型淋巴细胞增多白细胞直方图（1-13）虚线为正常白细胞曲线异型淋巴细胞群单核细胞群 有核细胞干扰直方图白细胞直方图显示淋巴细胞起点较高，分类值后均显示警号。提示淋巴细胞左侧区有异常，可能存在有核红细胞、巨大血小板或乳糜颗粒等。（图1-14~1-15） 3590160300450%巨大血小板干扰白细胞直方图（1-14）巨大血小板群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%有核红细胞干扰白细胞直方图（1-15）有核红细胞群虚线为正常白细胞曲线 3590160300450%有核红细胞干扰白细胞直方图（1-15）有核红细胞群虚线为正常白细胞曲线 血小板聚集干扰直方图血小板聚集易引起仪器堵塞；若其三五成群呈微小结构聚集，仪器将血小板团误认为巨大血小板，白细胞直方图显示和巨大血小板干扰相似（图1-16）；通常血小板聚集使血小板计数会有不同程度地下降。仪器报警说明结果不可靠或管道堵塞，应重新取样本复查。 3590160300450%血小板聚集干扰白细胞直方图（1-16）血小板聚集干扰群虚线为正常白细胞曲线 二、红细胞直方图仪器在36~360fl范围内分析红细胞，横坐标表示红细胞体积，纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。正常红细胞主要分布在50~200fl范围内（图1-2），直方图上可见两个细胞群体，从50~125fl区域有一介几乎两侧对称、较狭窄的正态分布曲线，主峰右侧约分布在125~200fl区域的细胞为大红细胞和网织红细胞。红细胞体积大小发生变化，直方图可出现左移、右移或出现双峰现象。 100200300400%正常红细胞直方图（2-1）两侧对称、正态分布曲线 100200300400%红细胞左移、右移直方图（2-3）紫红色虚线为正常红细胞直方图蓝色曲线为红细胞左移直方图黑色曲线为红细胞右移直方图 红细胞直方图与参数关系红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比容、红细胞平均指数、红细胞体积分布宽度都会影响直方图的形态；为此先行了解各参数之间的关系对红细胞直方图的判别有较大帮助。红细胞直方图主要对于临床贫血患者有诊断价值。 红细胞平均指数包括：红细胞平均容积（MCV）：指每个红细胞平均体积的大小，用飞升（fl）表示；红细胞平均血红蛋白含量（MCH）：指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量，以皮克表示（pg）；红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）：指每升红细胞中所含血红蛋白浓度，用克每升表示（g/L）。 红细胞平均指数计算公式红细胞平均容积（MCV）=每升血液中血细胞比容÷每升血液中红细胞个数=HCT÷RBC红细胞平均血红蛋白含量（MCH）=每升血液中血红蛋白含量÷每升血液中红细胞个数=HGB÷RBC红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）=每升血液中血红蛋白含量÷每升血液中血细胞比容=HGB÷HCT 红细胞体积分布宽度（RDW）RDW是一个较新的红细胞参数，由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数（CV）表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观准确。RDW结果的判断应结合临床及红细胞直方图的变化，同时分析其异常是否由于红细胞碎片、红细胞聚集或双相性细胞引起。 红细胞参数的意义红细胞的三个平均指数都由红细胞计数、血红蛋白含量、红细胞比容三者经固定公式计算得出。单独某个参数对疾病无诊断意义，必须联合多个参数才能有效鉴别。1983年Bessman提出用MCV和RDW两项参数作为贫血的形态学分类指标。如今，我们使用MCV、RDW配合红细胞直方图，则更有助于判别贫血的病情和疗效。 红细胞直方图在贫血中的应用1、小细胞性贫血：指细胞体积较小，MCV低于正常值。包括以下情况：①：RDW正常，红细胞主峰左移，分布在55~100fl，顶峰在75fl处，基底较窄为典型均一性图形，提示为小细胞低色素；常见于轻型珠蛋白生成障碍性贫血；（图2-3） 100200300400%轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血直方图（2-3）虚线为正常红细胞曲线小细胞均一细胞群 ②：RDW轻度增高：红细胞主峰左移，分布在55~100fl，顶峰在65fl处。提示为小细胞低色素细胞不均一性，常见缺铁性贫血；（图2-4）临床用铁剂治疗有效后，直方图有明显变化，可出现双峰图形。（图2-5） 100200300400%缺铁性贫血直方图（2-4）虚线为正常红细胞曲线小细胞不均一细胞群 100200300400%缺铁性贫血经铁剂治疗后直方图（2-5）虚线为正常红细胞曲线治疗前曲线治疗有效后曲线（双峰） ③：RDW明显增高：红细胞直方图显示两个细胞峰，小细胞峰明显左移，峰顶位于50fl处，较大细胞峰位于90fl，基底较宽；提示为小细胞低色素和不均一性。见于铁粒幼细胞性贫血（图2-6）。在骨髓细胞学细胞铁染色片中可见环形铁粒幼细胞，百分比＞15%为确诊依据。缺铁性贫血治疗有效时，也可出现类似图形（图2-5）。 100200300400%铁粒幼细胞性贫血直方图（2-6）虚线为正常红细胞曲线双主峰曲线 2、大细胞性贫血：指MCV超过正常范围，红细胞体积较大。包括以下情况：①RDW正常：红细胞主峰明显右移，主要分布在75~130fl，顶峰位于100fl处，提示为大细胞性，体积较一致。见于溶血性贫血、白血病前期、再生障碍性贫血。（图2-7） 100200300400%再生障碍性贫血直方图（2-7）虚线为正常红细胞曲线大细胞群，主峰在100fl ②RDW轻度增高：红细胞峰明显右移，基底增宽，主峰在75~150fl，峰顶约在105fl处，提示为大细胞不均一性。见于因叶酸、维生素B12缺乏引起的巨幼细胞性贫血。（图2-8） 100200300400%巨幼细胞性贫血直方图（2-8）虚线为正常红细胞曲线曲线右移，主峰顶在105fl处 ③RDW明显增高：红细胞峰明显右移，出现两峰，以100fl处细胞峰为主。提示大细胞不均一性，常见于巨幼细胞性贫血叶酸、维生素B12治疗初期。（图2-8）巨幼细胞性贫血经维生素B12、叶酸治疗后可出现向正态转变曲线。（图2-9） 100200300400%巨幼细胞性贫血治疗有效直方图（2-8）虚线为正常红细胞曲线治疗有效初期双峰曲线治疗前期曲线 100200300400%巨幼细胞性贫血治疗有效直方图（2-9）虚线为正常红细胞曲线治疗有效向正态曲线转变治疗前期曲线 3、正细胞性贫血直方图示正常分布，细胞大小较一致，血十八项中红细胞与血红蛋白成比例降低，RDW可正常，也可轻度增高。常见于慢性病、骨髓纤维化、骨髓发育不良、急性失血等。（图2-10） 100200300400%急性失血性贫血直方图（2-10）虚线为正常红细胞曲线曲线无明显异常 三、血小板直方图仪在2~30fl范围内分析血小板。正常血小板呈左偏态分布（图3-1），主要集中在2~15fl内。由于血小板检测与红细胞检测在仪器内的同一通道，小红细胞和细胞碎片、血小板自身的聚集都会影响血小板计数及平均血小板体积。直方图能反映这些变化，可根据图形的变化，了解血小板计数的准确性。 102030%正常血小板直方图（3-1）左偏态分布曲线 102030%正常血小板直方图（3-1）左偏态分布曲线 1、大血小板增多：直方图图形右移，血小板平均体积（MPV）偏大，血小板分布宽度（PDW）延长，若凝血功能障碍应引起重视。（图3-2）2、小血小板增多：直方图图形稍左移，血小板平均体积偏小，血小板分布宽度正常，血涂片中可见较多小血小板，无特殊临床价值。（图3-3） 102030%大血小板直方图（3-2）曲线右移、PDW延长虚线为正常血小板曲线 102030%小血小板直方图（3-3）曲线左移虚线为正常血小板曲线 ３、小红细胞干扰：直方图显示峰的右侧离横坐标较高，呈拖尾状。提示血小板分布异常，红细胞直方图示小体积红细胞增多，白细胞直方图正常。（图3-4） 102030%受小红细胞干扰血小板直方图（3-4）血小板的拖尾现象虚线为正常血小板曲线 102030%受小红细胞干扰血小板直方图（3-4）虚线为正常血小板曲线血小板的脱尾现象 4、血小板聚集：直方图显示左侧起点较高，离横坐标有0.6cm，右侧在20fl处，离横坐标0.4cm，与正常血小板直方图有明显差异，可提示血小板聚集。（图3-5）MCV和RDW正常可排除小红细胞干扰，在白细胞直方图上35fl处有一小峰。（图1-14） 102030%小红细胞干扰血小板直方图（3-5）0.6cm虚线为正常血小板曲线0.4cm 3590160300450%血小板聚集干扰白细胞直方图（1-14）血小板聚集干扰群虚线为正常白细胞曲线 谢谢聆听