血细胞直方图.ppt

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1、血细胞直方图检验科马燕血细胞计数原理一、电阻抗法库尔特原理(亦称：电阻法、电脉冲法与电感应区技术)：悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时，取代相同体积的电解液，在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化，产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。与等渗电解质溶液相比，血细胞为不良导体，血细胞电阻值>稀释液的电阻值血细胞通过检测器小孔管微孔的孔径感受器区时，检测器内外电极之间的恒流源电路上电阻值瞬间增大，产生一个电压脉冲信号。脉冲信号数=细胞数小孔管：电阻抗法细胞计数的一个重要组成部分。当电流接通，位于小孔两侧的电极

2、产生恒定电流。若供给的阻抗是稳定的，则小孔的电压不变。当有一个细胞通过小孔时，电阻会增加，瞬间引起电压变化，即“通过脉冲”细胞体积越大，脉冲振幅越高；细胞数量越多，脉冲数量越多各种大小不同细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内电脑的各个通道，运算出各种细胞参数。细胞群体大小分布情况的图形，就成为“细胞体积直方图”脉冲信号经过以下步骤，得出细胞计数：信号发生：各种微粒通过检测小孔时，“信号发生器”产生脉冲信号放大：将血细胞产生的微弱脉冲信号，通过“放大器”放大阈值调节：“阈值调节器”在一定范围内调节参考电平的大小，能区分不同群细胞合适的信号电平，使计数结果尽可

3、能符合实际甄别：利用“甄别器”，根据阈值调节器提供的参考电平，将低于参考电平的假信号（细胞碎片、杂质微粒）去掉整形：通过“整形器”，将脉冲信号波形修整成一致标准的平顶波，显示为不同类群的细胞数计数：经过以上步骤偶，进入“计数系统”，得出结果电阻抗法可精确测出细胞（或类似颗粒）大小，是三分类的主要应用原理，也与光学检测原理，共同应用于五分类血细胞分析仪中。仪器将每个细胞的脉冲根据其体积大小分配并储存在相应体积通道中，每个通道收集的数据被统计出：相对数，表示在Y轴上；体积，表示在X轴上。白细胞体积从30-450fl分为256个通道，每个通道1.64fl，依

4、据体积大小分别放在不同通道中，得出直方图。第一群：小细胞群，主要为淋巴，体积35-90fl第二群：中间细胞群，主要为单核，体积90-160fl第三群：大细胞群，主要为中性粒，体积可>160flPlat和RBC共用一个孔管。正常人RBC体积和Plat体积有明显的界限，因此Plat计数准确容易。当血细胞悬液中含有异常血细胞(如小RBC）时，则划分界限不清。为使Plat计数有较高的准确性，计算机对Plat和RBC分布图进行判断，将Plat计数的上限阈值判定线放在RBC和Plat分布图交叉部分的最低处计数。白细胞直方图三分类血球仪一般以电阻抗原理进行WBC分类

5、。依据大多数正常形态的WBC在溶血素作用后的大小排列，人为设置4个鉴别线，将直方图分为三个区域。计数WBC时，加入溶血素，使RBC破坏，而WBC膜受到破坏后胞浆流失，WBC体积大小发生变化。因此，WBC直方图上细胞排列顺序不是细胞的原始大小，而是经溶血液修饰后的细胞大小。电阻抗原理：血细胞非导电性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，通过检测小孔时，引起电阻的变化，从而对血细胞计数和分类加入溶血素前的细胞大小加入溶血素后的细胞大小一、设置鉴别线：低鉴别线(LD)：自动寻找30-60fl之间最适位置高鉴别线(UD)：定在300fl，用作粒度分布异常监视鉴别

6、线1(T1):自动寻找从LD~UD之间WBC分布曲线的波谷，第一波谷值设为“TROUGH”T1鉴别线2(T2):自动寻找从LD~UD之间WBC分布曲线的波谷，第二波谷值设为“TROUGH”T2仪器是如何分类WBC?报警信息列表WL：LD的相对度数>规定值，可能——存在Plat聚集？较多巨大Plat?WU：UD的相对度数>规定值，可能——溶血不充分？较多异常细胞？T1：当第一谷值不能决定时T2：当第二谷值不能决定时F1：小WBC分布异常。T1的相对度数>规定值F2：中WBC分布异常。T1或T2的相对度数>规定值F3：小WBC分布异常。T2的相对度数>规定

7、值2、监视WBC粒度分布的情况，提供异常分布信息分布正常时，直方图为三峰性分布，在LD、UD之间有两个谷值T1和T2当各值鉴别线不能设定，或在设定的鉴别线位置的度数比规定值高时，将标有WBC粒度分布的异常报警。二、鉴别线作用：1、对正常形态的WBC进行粒度分类LD~T1：为W-SCR%，相当于LYM%T1~T2：为W-MCR%，相当于MEX%(M、E、B）T2~UD：为W-LCR%，相当于NEUT%1.3.LD度数高，无T1、T2：WBC有结果，但标有报警“WL”。其余结果无，报警“WL”。1.1.LD度数高：所有结果都有，但标报警“WL”。常见于：存

8、在RBC溶血不全？有核RBC？大Plat增多？Plat聚集?纤维蛋白析出？…1.2.LD度数高