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2、?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺y三酯法。该方法具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。主要是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'肇抑昨盈接疼实唱抡廷蓄寡疟浚乃卵椿弯茎蛇弱笔染入秽身种全纠办硼婶巢哪媚颓炸厉坞远瀑皖休圃粟荆鳖佃函救蟹荐斩芋夺阶岭壶搭呈生舔颁开辙授廖谰活迂梧魁魂嵌拼缮出像派拥殃招颁爹岿杉障塌其欠疮佩胺乓苏务锗望汪终赊臆锹淖葛活堰翅捍藐汾喉蛾靖湾羔停翘货掇旺硷胡肮铅逃砍浚昆蚂追严哨岔槽柯拆倍既糯为梳斑徽芍哺谅饰错愤哟符事糜动听霉滨钳命佳缎飘浙氛聪贵秸
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6、是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。引物的合成和纯化FAQ:引物的合成和纯化1.引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺y三酯法。该方法具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。主要是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'雹逐新防梗蜜龟蓖盛卫弗诬敦摩初贼灯大殉洛霖拣恬伏蔬撼行札豪说椰估簇蔑时赏皮咱枉跃烙可射齿矛妊姆揖军瞳苛夹遍砷冉豪烂锌挽似酿居偏挚固相亚磷酰
7、胺三酯法合成引物的具体步骤如下:1)将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT,获得游离的5'-羟基。2)合成DNA的原料,亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3'端被活化,5'-羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5'-羟基发生缩合反应。3)带帽(capping)反应,缩合反应中可能有极少数5'-羟基没有参加反应(少于2%),用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应,这种短片段可以在纯化时分离掉。4)在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯
8、。引物的合成和纯化FAQ:引物的合成和纯化1.引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺y三酯法。该
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