恶性肿瘤患者外周血t淋巴细胞cd25的测定与临床检验学研究

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1、恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25的测定与临床检验学研究[]目的探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25+水平的临床意义。方法用流式细胞仪检测70名正常人和274例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+水平。结果恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+水平比正常人高，差异有统计学意义（P<0.05）；恶性肿瘤患者外周血CD8+CD25+水平与正常人比较，差异无统计学意义（P>0.05）。其中，食管癌、肝癌和肺癌的CD4+CD25+水平与正常人比较，差异有统计学意义（P<0

2、.05）；肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4+CD25+水平与正常人比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标。　　[关键词]恶性肿瘤；CD4+CD25+；CD8+CD25+；流式细胞术　　[]R446.6[]A[]1674-4721（2012）11（b）-0099-02　　CD25+是低亲和性IL-2受体（IL-2R）的α链，表达于激活的T淋巴细胞、B细胞、NK细胞和巨噬单核细胞表面。近年来有报道肿瘤患者外周血血清中可溶性

3、白细胞介素2受体（sil-2R）的水平升高可作为病情判断、监测的免疫指标，但对外周血淋巴细胞膜白细胞介素2受体（mil-2R）的报告结果不一[1-4]。为了解恶性肿瘤患者外周血mil-2R（CD25）活性水平的临床意义，本文对恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25水平进行了检测分析。　　1资料与方法　　1.1一般资料　　2010年1月～2011年12月经本院病理细胞学确诊的住院肿瘤患者274例，其中，食管癌100例、肝癌84例、肠癌32例、胃癌18例、肺癌18例、鼻咽癌22例；另选择70名健康体检者作

4、正常对照。　　1.2方法　　应用流式细胞仪（美国BD公司，型号FAScalibur）及美国PharMingen公司的单克隆试剂，用三色法测定外周血T淋巴细胞CD25百分数水平。取正常人、患者外周血2mL用肝素抗凝。取20μL抗体加入12mm×75mm的塑料小管底部，每例做2管，1管IgG三色阴性对照，2管CD8-FITC/CD25FE/CD4-Cychrome；每管加入50μL的抗凝全血，充分混匀后室温放置20min，每管再加入2ml溶血素，充分混合后室温放置10～15min，1000转离心5min

5、，弃上清，加2mLPBS液清洗，再离心，弃上清，加1%多聚甲醛0.3mL，上机进行荧光检测，流式细胞仪采集淋巴细胞窗内5000个细胞用CellQuest软件分析阳性标记细胞百分率。　　1.3统计学方法　　采用统计软件包SPSS11.0分析统计检测结果。　　2结果　　2.1正常人与恶性肿瘤患者CD4+CD25+和CD8+CD25+抗体的表达　　正常人和恶性肿瘤患者之间的CD4+CD25+抗体的表达差异统计学意义（P<0.05），但CD8+CD25+抗体的表达差异无统计学意义（P>0.05）

6、。详见表1。　　2.2几种恶性肿瘤患者CD4+CD25+和CDa+CD25+抗体的表达　　选取例数较多的几种恶性肿瘤，分析它们CD4+CD25+和CD8+CD25+抗体的表达情况，结果显示，食管癌、肝癌和肺癌的CD4+CD25+抗体的表达与正常人比较，差异有统计学意义（P<0.05）；肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4+CD25+抗体的表达与正常人比较，差异无统计学意义（P>0.05）。以上几种恶性肿瘤患者外周血CD8+CD25+抗体表达与正常人比较，差异无统计学意义（P>0.05）。详见

7、表2。　　3讨论　　SakaguchiS等[5]于1995年发现未免疫小鼠外周循环中的CD4+T细胞约10%表达CD25+，将除去了CD25+的CD4+单阳性T细胞过继转给T细胞缺陷小鼠，能导致宿主各种器官特异性的自身免疫疾病。而将CD4+CD25+和CD4+单阳性T细胞过继转移，则能防止自身免疫疾病发生，说明CD4+CD25+T细胞和维持自身免疫耐受有关[6-7]。恶性肿瘤的发生及其生长过程中，机体早期对肿瘤处于无反应状态，这种“免疫耐受”可能和CD4+CD25+有关[8-10]。　　从本实验检测

8、的274例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+的数据可以看出其含量明显高于正常人（表1），表明恶性肿瘤患者机体对肿瘤处于无反应免疫耐受状态和CD4+CD25+细胞群的增加有关，支持了上述观点。肠癌、胃癌、鼻咽癌的均值均高于正常人，但是经统计学处理其差异无统计学意义，可能是因为例数太少，有待今后进一步观察。恶性肿瘤患者外周血CD8+CD25+水平与正常人没有显著性差异。　　综上所述，恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+的测定可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标之一，对于临床